丹参多酚酸盐微生物限度检查方法的建立(2)
1.3.1 菌液的制备
取经培养的铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌TSB新鲜培养物及白色假丝酵母SDB新鲜培养物按照2015版中国药典四部有关内容培养备用。
1.3.2 供试液的制备
取丹参多酚酸盐供试品10 g，加pH 7.0的无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100 ml，混匀，制得供试液A。另取丹参多酚酸盐供试品10 g，加含3%(v/v)聚山梨酯80的pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液分散均匀，调节pH至7.02，然后加稀释液至100 ml，混匀，制得供试液B。
1.3.3 抗菌活性的去除或灭活方法
1)稀释法 ①试验组：取制备好的供试液A，加入试验菌液，混匀，使含菌量不大于100 cfu/ml，取1 ml菌液，等量分注于5个无菌平皿，立即倾注20 ml相应琼脂培养基，摇匀，凝固后于规定温度下倒置培养48～72 h，计数。②供试品对照组：取制备好的供试液，用稀释液代替菌液同试验组操作。③菌液对照组：取稀释液替代供试液，按试验组操作加入试验菌并进行回收试验。④阴性对照组：以稀释液代替供试液同试验组操作，但稀释液中不加入菌液。
2)中和剂法 增加稀释剂对照组：取含3%(v/v)聚山梨酯80的pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液替代供试液 ......
您现在查看是摘要页，全文长 4594 字符。
取经培养的铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌TSB新鲜培养物及白色假丝酵母SDB新鲜培养物按照2015版中国药典四部有关内容培养备用。
1.3.2 供试液的制备
取丹参多酚酸盐供试品10 g，加pH 7.0的无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100 ml，混匀，制得供试液A。另取丹参多酚酸盐供试品10 g，加含3%(v/v)聚山梨酯80的pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液分散均匀，调节pH至7.02，然后加稀释液至100 ml，混匀，制得供试液B。
1.3.3 抗菌活性的去除或灭活方法
1)稀释法 ①试验组：取制备好的供试液A，加入试验菌液，混匀，使含菌量不大于100 cfu/ml，取1 ml菌液，等量分注于5个无菌平皿，立即倾注20 ml相应琼脂培养基，摇匀，凝固后于规定温度下倒置培养48～72 h，计数。②供试品对照组：取制备好的供试液，用稀释液代替菌液同试验组操作。③菌液对照组：取稀释液替代供试液，按试验组操作加入试验菌并进行回收试验。④阴性对照组：以稀释液代替供试液同试验组操作，但稀释液中不加入菌液。
2)中和剂法 增加稀释剂对照组：取含3%(v/v)聚山梨酯80的pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液替代供试液 ......
您现在查看是摘要页，全文长 4594 字符。