rhG-CSF包含体处理工艺改进(2)
1.3.2 原工艺和改进后工艺
赛格力一批发酵所获得的包含体分成4个亚批进行处理。首先，包含体分别经纯化水、A液、B液洗涤，每次洗涤后均离心收集沉淀。B液洗涤后收集的沉淀，用C液溶解后，收集上清液，然后在上清液中加入冷冻后的丙酮(在冰浴条件下)进行搅拌离心，收集沉淀，最后用变性剂D液溶解，离心获得含变性蛋白的上清液(图1)。
改进后工艺流程和改进前一样，只是前5步用管式离心机代替转子离心机，但是考虑到安全原因，丙酮沉淀后的步骤还是保留使用转子离心机。
1.4 检测方法
内毒素检测：按照《中国药典》2015年版通则1143方法1 凝胶法进行检测。
残余DNA测定：按照《中国药典》2015年版通则3407第一法 DNA探针杂交法进行检测。
电泳方法：按照《中国药典》2015年版通则0541第五法SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行检测 ......
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赛格力一批发酵所获得的包含体分成4个亚批进行处理。首先，包含体分别经纯化水、A液、B液洗涤，每次洗涤后均离心收集沉淀。B液洗涤后收集的沉淀，用C液溶解后，收集上清液，然后在上清液中加入冷冻后的丙酮(在冰浴条件下)进行搅拌离心，收集沉淀，最后用变性剂D液溶解，离心获得含变性蛋白的上清液(图1)。
改进后工艺流程和改进前一样，只是前5步用管式离心机代替转子离心机，但是考虑到安全原因，丙酮沉淀后的步骤还是保留使用转子离心机。
1.4 检测方法
内毒素检测：按照《中国药典》2015年版通则1143方法1 凝胶法进行检测。
残余DNA测定：按照《中国药典》2015年版通则3407第一法 DNA探针杂交法进行检测。
电泳方法：按照《中国药典》2015年版通则0541第五法SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行检测 ......
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