糜蛋白酶原粗品中猪牛羊源性成分的PCR检测(2)
![]() |
1.2 仪器
7500-Fast实时荧光PCR仪(美国Applied Biosystems Ltd.);Gusto微量离心机和LP涡旋振荡器(美国Thermo Ltd.);HH-W600数显恒温三用水箱(上海乔跃公司);电子天平(上海精科公司);电泳仪(美国BioRad公司);蓝光切胶仪(上海生工生物公司)。
1.3 实验方法
1.3.1 糜蛋白酶原粗品中残留DNA的提取
称取约250 mg糜蛋白酶原粗品,利用Ezup柱式動物基因组DNA抽提试剂盒进行DNA的提取,以50 ml CE Buffer洗脱,所得DNA溶液于-20 ℃保存或进行PCR检测。
1.3.2 实时荧光PCR
以Biogx反刍源和猪源DNA检测试剂为基础构建糜蛋白酶原粗品的实时荧光PCR检测体系:每管实时荧光PCR检测粉末用100 ml纯水溶解成反应预混液。反应预混液25 ml,模板DNA 1 ml。PCR反应条件为:95 ℃变性120 s ......
您现在查看是摘要页,全文长 3839 字符。