2 内毒素的检测方法

    2.1 鲎变形细胞溶解物(limulus amoebocyte lysate， LAL)试验

    内毒素的检测常用家兔热原法和LAL试验(简称为“鲎试验”)法。家兔热原法是检测内毒素的第一种标准方法，鲎试验法则是目前最常用的内毒素检测方法。我国药典收载的细菌内毒素检测方法为鲎试验法，包括2种方法，即凝胶法和光度测定法，后者又包括浊度法和显色基质法。当各种检测法得到的检测结果不一致时，以凝胶法的检测结果为准。检测过程中应防止内毒素污染。鲎试验法检测须使用鲎试剂。鲎试剂是从海洋节肢动物鲎的血液中提取其变形细胞溶解物、再经低温冷冻干燥制成的一种生物试剂，其因能与内毒素和(1，3)-β-D-葡聚糖反应形成凝胶而被广泛用于检测食品、水源、药品、医疗器械以及动物和人体体液等不同样本中的内毒素。鲎的血液和淋巴液中有一种有核的变形细胞，这种细胞胞浆内有大量的致密颗粒，内含凝固酶、C-因子、B-因子和凝固蛋白原等。内毒素与鲎试剂接触后可激活C-因子，激活的C-因子又可激活B-因子或由(1，3)-β-D-葡聚糖激活G-因子，激活的B-或G-因子可再激活凝固酶原，使之转变为凝固酶，继而使可溶性的凝固蛋白原转变成凝固蛋白，由此使鲎试剂变为凝胶状态[1 ......