1 对象与方法

    1.1 研究对象和分组

    选用M-1细胞(小鼠肾皮质集合管上皮细胞，购自美国菌种保藏中心ATCC)作为研究对象，培养于37 ℃、5% CO2环境下含有5%胎牛血清和5 mmol/L 地塞米松的DMEM：F12中。将M-1细胞分为空白对照组、黄芪汤组和阿米洛利阳性对照组，其中阿米洛利是ENaC的特异性抑制剂。开始检测前，用胰蛋白酶分离M-1细胞并转移至含有5 mmol/L 地塞米松的DMEM：F12中，在37 ℃、5% CO2环境下进行培养，其中黄芪汤组予1 000 mg/ml黄芪汤提取物预孵，阿米洛利组予2 μmol/L 阿米洛利(英国Abcam公司)预孵，24 h后开始检测。三组细胞分别给予纯化的纤溶酶(美国Sigma公司)刺激后，采用膜片钳技术测定其膜电流强度变化。

    1.2 含黄芪汤培养基的制备

    黄芪汤方剂组成(kg)：黄芪2、茯苓2、麦门冬2、五味子1、生地黄3、瓜蒌根2和炙甘草1，共计13 kg。加4倍量水，热回流提取2 h后过滤，挤干滤渣内水分 ......