增加除菌级过滤器重复使用的可行性探讨(2)
1.3.1 实验组细菌截留实验[5-7]:分别将使用过3次的除菌级过滤器和滤膜用纯化水清洗干净,于121 ℃湿热灭菌45 min,按图1所示安装后,在室温条件下将缺陷假单胞菌悬于 4 000 ml纯化水中,使菌液濃度≥1.0×107 CFU/cm2的有效过滤面积。以 0.20~0.22 MPa的压力进行连续过滤。菌液过滤后,对下游管路抽真空后将实验组滤器组件移至生物安全柜。在无菌操作条件下,将滤膜转移至含 TSA培养基的培养皿内,(30±2)℃培养 48 h~7 d。观察并记录菌落数量。对菌落进行鉴别,验证是否为缺陷假单胞菌。
1.3.2 阴性对照实验
在进行细菌截留实验之前需进行阴性对照实验,目的是检验装置系统的灭菌效果。在截留装置中加入适量纯化水,使其通过待验证过滤器及其下游管道,再经过0.45 μm滤膜(阴性对照组滤器组件滤膜)收集后将滤器组件移至生物安全柜。以无菌操作方式将上述阴性对照膜转移至含 TSA培养基的培养皿内,(30±2)℃培养48 h~7 d。观察并记录菌落数量。
1.3.3 阳性对照实验
阳性对照实验主要证明细菌截留实验中所用的缺陷假单胞菌是否符合法规要求。步骤概括如下:将适量的缺陷假单胞菌悬浮液加入到截留装置中,并且满足菌液的浓度≥1.0 ×107 CFU/cm2有效过滤面积。将含有缺陷假单胞菌的悬浮液通过0.45 mm滤膜(阳性对照组滤器组件滤膜) ......
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