1.2 实验方法

    制备工艺流程见图1。

    1.2.1 粗品溶解

    称取胰蛋白酶原粗品1 000 g，加入5倍量(V/W)酸性水溶液(用2.5 mol/L H2SO4调节纯化水至pH 2.8～3.2)搅拌，直至全部溶解。

    1.2.2 病毒灭活

    粗品溶液于20～25 ℃孵放60 min。在此条件可使病毒表面的细胞抗原电荷发生改变，蛋白质的空间结构发生不可逆变性，从而使病毒丧失与细胞受体结合的能力，不能进入细胞完成侵染[7]，达到灭活病毒的目的。

    1.2.3 超滤除盐

    病毒灭活后的粗品溶液，于4 ℃、4 000 r/min的条件下离心15～20 min，取上清液，加入等体积pH 3.0水溶液，用截留分子量为10 kDa的中空纤维膜柱超滤除盐至1/2体积；补加等体积pH 3.0水溶液，超滤至1/2体积；重复以上操作，直至电导率降至5 ms/cm以下 ......