孙源远 王欣 周辉 刘弘忍

    (上海上药第一生化药业有限公司 上海 200240)

    随着动物源性组织、细胞、体液制备的生物制品逐渐增多，应用范围越来越广，生物组织提取制品中潜在的动物源性病毒感染问题愈发受到关注[1-2]。2005年国家药品评审中心发布《生物组织提取制品和真核细胞表达制品的病毒安全性评价技术评审一般原则》，规定对生物组织提取制品生产工艺进行病毒去除/灭活验证及有效工艺步骤的评价[3-4]。目前由动物组织提取的生化药制品，大多采用有机试剂提取、酸碱提纯、盐析梯度沉淀等方法对生物组织中的有效成分进行提取，但其生产工艺中缺乏病毒去除/灭活的步骤，这一方面不符合现行药品法规的规定，另一方面也对后续的药品质量埋下隐患。因此，本研究针对动物组织提取中较为常见的工艺步骤，增加病毒去除/灭活验证，完善工艺质量体系。

    1 材料和方法

    1.1 样品

    三批次垂体前叶粉(批号为161029、161112和170101，泰兴市金叶农副产品有限公司)：三批次垂体前叶沉淀前滤清液(批号为520171102、520171103和520171104)、三批次硫酸鱼精蛋白粗制中间体(批号490190401-1、490190402-1和490190403-1)、三批次硫酸鱼精蛋白精制中间体(批号490190401-2、490190402-2和490190403-2)均来自上海上药第一生化药业有限公司。

    1.2 指示病毒

    考虑指示病毒的基因组、有无包膜和理化抗性等因素，同时结合促皮质素和硫酸鱼精蛋白的病毒灭活验证工艺，选择了六种具有代表性的指示病毒(表1)。

    表1 指示病毒及其理化性质

    1.3 方法

    促皮质素病毒去除/灭活工艺验证都选择加热步骤和丙酮沉淀步骤；硫酸鱼精蛋白病毒去除/灭活工艺验证选择酸醇处理步骤和加热步骤 ......