郝士婧 张黎 王琪

    (上海上药第一生化药业有限公司 上海 200240)

    肝素是世界上最有效和临床用量最大的抗凝血药物，主要应用于心脑血管疾病和血液透析治疗，其中，其在血液透析治疗中是唯一有效的特效药物[1-2]。

    中国药典2020年版、美国药典、欧洲药典均收录了生色底物法测定肝素钠的效价[3-5]，文献所报道的内容多侧重于生色底物法与兔全血法进行方法对比[6-7]，抗Ⅹa因子和抗Ⅱa因子反应特性[8-9]，减少实验试剂用量的研究[10-12]等。本研究使用两种不同的测试手段进行生色底物实验，考察两种手段的实验特性，对比实验结果，给实验室提供更加合适的实验方案。

    实验生色底物法利用生色底物在特定可见光下的吸光度来定量反应程度，可见光和吸光度可以由紫外可见分光光度计或酶标仪两种技术手段提供，由于方法采用了生物检定量反应的平行线法，考虑酶标仪样品池恒温并且一次多量的读数方式更为便捷，但得到的数据可信限率经常在5%以上[6-7]。采用紫外可见分光光度计需配备另外的恒温装置，由于紫外可见分光光度计所需求的待测溶液量较大，操作方法更复杂，相应的实验成本也较高。实验室拟考察采用紫外可见分光光度计和酶标仪两种方法，对比它们的便捷程度、实验成本、结果可靠信和可信限率。

    1 材料和方法

    1.1 实验原理

    血液中Ⅱa因子和Ⅹa因子起到了凝血作用的90%以上 ......