香鳞毛蕨提取物对红色毛癣菌的抑制作用研究
角鲨烯环氧化酶,β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶
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摘要:目的 研究香鳞毛蕨醇提取物对红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶和β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶的抑制作用, 初步探讨其抗真菌作用机制。方法 采用ELISA测定角鲨烯环氧化酶活性,还原糖法测定β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶活性。结果 香鳞毛蕨提取物不同浓度组均能降低红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶的活性,差异有统计学意义(P<0.05),随香鳞毛蕨提取物浓度增加,红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶的活性逐渐降低,香鳞毛蕨提取物中浓度组和高浓度组能降低β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶活性,差异有统计学意义(P=0.002,P=0.000)。结论 香鳞毛蕨提取物抗真菌作用机制可能和角鲨烯环氧化酶和β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶活性受到抑制有关。
关键词:香鳞毛蕨提取物;红色毛癣菌;角鲨烯环氧化酶;β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶
红色毛癣菌T. rubrum 是临床常见的皮肤癣菌, 也是浅部真菌病的主要病原菌,是一种在世界范围内广泛传播的病原真菌, 它能引起各种浅表感染, 如头癣、体癣、股癣、手癣、足癣以及甲癣。红色毛癣菌是一种专性致病菌,一旦感染红色毛癣菌则很难根治,在停用抗真菌药物后会经常复发[1]。
香鳞毛蕨(Dryopteris fragrans L.)为鳞毛蕨科鳞毛蕨属植物,生长于海拔1000~1700m的山坡或岩石缝中,用于治疗真菌感染的手足癣、体股癣等,疗效甚佳,不易复发[2]。为了探讨香鳞毛蕨提取物抗皮肤癣菌的作用机制, 本实验研究了香鳞毛蕨提取物对红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶活性和β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶的影响, 为研究香鳞毛蕨抗真菌作用原理提供实验依据。
1 材料
1.1药物 供试药材本实验研究所用的香鳞毛蕨采集于黑龙江省,经鉴定为鳞毛蕨科鳞毛蕨属植物香鳞毛蕨,香鳞毛蕨提取物采用70% 醇提液,用二甲基亚砜(DMSO)配制成含生药浓度为625mg/ml的储存液, 存于-70℃冰箱备用。
1.2菌株 红色毛癣菌购自中国医学科学院皮肤病防治研究所菌种保藏中心。
1.3 主要试剂 真菌角鲨烯环氧化酶酶联免疫分析试剂盒;真菌细胞β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶活性定量检测试剂盒, 美国GENMED SCIENTIFICS INC 产品。
1.4主要仪器 生化培养箱(Forma 3111), 美国赛默飞世尔科技产品;生物安全柜(Thermo Forma 1389),美国赛默飞世尔科技产品;高速低温离心机 ......
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