结核分枝杆菌MPB64抗原的制备与纯化(2)
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参见附件。
2结果
2.1 MPB64基因的克隆 以基因组模板进行PCR，扩增得到了大小约687bp左右的目的条带(图1)，与预期大小一致。构建重组质粒pET32a+-mpb64后测序结果表明，所克隆MPB64基因序列与GenBack发表的基因序列同源性为98.36%。
3讨论
结核分枝杆菌作为人兽共患结核病的病原微生物，长久以来一直威胁着养殖业的发展和人类的健康，鉴于早期诊断的重要性，筛选特异性抗原就显得尤为重要。结核分枝杆菌能够分泌多种保护性抗原成分，如CFP-10，ESAT-6、Aga85b、MPB70、MPB64等等，研究发现MPT64基因仅存在于 Tb 的 H37Rv，H37Ra，Erdman及BCG 的一些亚株如Tokyo，Moreau，Russian 株之中，而 BCG 的其他亚株 Glaxo，Pasteur，Canadian，Tice，Danish 1331 和麻风分枝杆菌则缺乏该基因[3]，并且MPB64作为早期结核分枝杆菌的特异性分泌蛋白，能够早期刺激机体产生较高水平的细胞和体液免疫应答，是开发疫苗和早期诊断的理想候选抗原[4-6]。
本实验成功从结核分枝杆菌基因组中扩增出MPB64基因 ......
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