结核分枝杆菌MPB64抗原的制备与纯化(1)
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摘要：根据GenBank结核分枝杆菌基因序列设计引物扩增出MPB64基因，连接至原核表达载体pET32a(+)，转化至大肠杆菌BL21(DE3)，经过IPTG诱导后，进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果表明，克隆的MPB64基因同源率为98.36%，重组蛋白以可溶形式在细胞周质中表达，大小为24KDa。采用切胶回收水平电泳洗脱纯化出的MPB64具有反应原性。为进一步研究结核快速诊断试剂奠定了基础。
关键词：牛分枝杆菌；MPB64；原核表达；切胶纯化
结核病(Tuberculosis)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis TB)引起的一种严重危害人民健康的慢性传染病，世界卫生组织(World Health Organization，WHO)2012年的数据显示，世界总共有880万的结核病患者，相当于每10万人中就有138个结核病患者，我国2010年结核病死亡人数54000，新发现结核患者869092，复发人数54216，新患者中出现MDR-TB人数为49000，再次感染的患者出现MDR-TB人数为14000，结核患者中得HIV的人数为145919，HIV患者中出现结核的人数为65412，相对于2006年后呈现逐渐增加的趋势，每年用于结核的治疗费用也从2006年开始递增，2011年已经花费285百万美元，预计2012年将花费350百万美元。
结核菌素试验作为最古老的免疫学试验方法之一，仍然在使用，对于牛分枝杆菌的特异性抗原的筛选，仍然是诊断中的重点 ......
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