大鼠酒精性心肌病心肌超微结构及血清TNF—α和MDA的变化及意义
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摘要:目的 研究大鼠酒精性心肌病(ACM)心肌超微结构及血清TNF-α和MDA的变化及意义。方法 采用灌胃法制备大鼠酒精性心肌病模型,模型组用40%酒精8g/(kg.d)分二次灌胃共12w,对照组灌等量的生理盐水,实验第8、12w末分批处死动物。用光学显微镜及电子显微镜观察大鼠心肌超微结构,测量血清TNF-α和MDA的变化。结果 与对照组相比模型组模型组可见大鼠心肌病变及炎性细胞浸润及血清TNF-α和MDA的变化。结论 长期摄入酒精可引起大鼠酒精性心肌病,TNF-α和MDA在酒精性心肌病过程中的发生发展中发挥重要作用。
关键词:酒精性心肌病;肿瘤坏死因子;丙二醛;电子显微镜;大鼠
酒精性心肌病(alcoholic cardiomyopathy (ACM))是指由于酒精长期摄入过量而导致的心肌损害等一系列病变。细胞变性、死亡是导致许多心脏疾病终末期表现和衰竭的重要机制,一些研究初步证实酒精导致细胞变性和死亡[1-3]。其原理可能是免疫反应和酒精直接损害心肌细胞是造成ACM的主要因素,对ACM的发生发展起着十分重要的作用。ACM的心肌损伤程度主要取决于细胞因子,这些因子包括TNF-a、MDA 等。
1 资料与方法
1.1一般资料 雄性Wistar大鼠由延边大学医学院动物科提供,体重为(180±10)g。利用放射免疫分析法检测血清TNF-a的水平,用硫代巴比妥酸(TBA)法测定血清丙二醛(MDA)的含量。
1.2大鼠ALD模型制造和取材 Wistar大鼠随机分为两组,模型组44只给予40%酒精(8g/kg.d)分二次灌胃共12w,对照组22只给予等量的生理盐水灌胃。实验第8,12w末分别处死22只动物,心脏采血,取心脏 一部分10% 中性福尔马林固定,常规石蜡包埋。另一部分用4%戊二醛保存送电镜室作电镜标本,试验模型参照文献[4]。
1.2血清TNF-a的测定
1.2.1试剂配制 ①125I-TNF1瓶(冻干品):低温保存,用前加缓冲液100ml;②TNF抗体1瓶(冻干品):用前加缓冲液12ml;③TNF标准品5瓶(冻干品):用前每瓶加缓冲液1.5ml,其浓度为:0.3, 0.9, 2.7, 8.1, 24.3ng/ml;④免疫分离试剂1瓶(悬浮液):用前充分摇匀;⑤缓冲液1瓶。
1.2.2将-70°保存的血清恢复至室温 ......
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