烯效唑时间分辨免疫分析方法研究(2)
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3 讨论
本文采用TRFIA技术进行烯效唑检测。其灵敏度(IC50)较ELISA[5]成倍增加,分析灵敏度可达到0.2mg/L,灵敏度提高了一个数量级。可见TRFIA法检测烯效唑比ELISA法灵敏度上具有明显优势。TRFIA具有独特的荧光特性,特异性荧光的衰变时间极长,为传统荧光的103~106倍,激发光与发射光之间的Stokes位移可达290 nm,而普通荧光素的Stokes位移仅为28nm[6-9],使得试剂标准曲线飘移小,更提高了试剂的稳定性和准确性。本文在研究过程中还发现,标记抗体和Eu3 +的标记量的控制非常重要,它们的量直接影响灵敏度和本底值。研究发现:低浓度标记抗体,标记效率高,但本底高;高浓度标记抗体,有助于提高灵敏度和降低本底,但其标记效率有所下降。
综上所述,本文建立的烯效唑-TRFIA法,具有灵敏度高和重复性好等优点,能够满足环境与食品中痕量烯效唑的检测需求,具有良好的应用价值。
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