电离辐射诱导的Rac1蛋白在HL—60细胞中表达的变化及其对细胞凋亡的影响
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摘要：目的 采用不同剂量的X线照射急性白血病细胞系HL-60，探究电离辐射后Rac1蛋白在HL-60细胞中表达的变化及其对辐射诱导细胞凋亡的影响。方法 藻红B染色观察细胞的凋亡，Western blot分析 Rac1蛋白的表达，免疫荧光检测Rac1蛋白在细胞内的分布。结果 2Gy、6Gy、8Gy的X射线照射HL-60细胞，24h后的细胞凋亡率分别为11.5%、18.0%、 30.1%。不同剂量的X线照射HL-60细胞24h后，总的Rac1蛋白表达未发生明显变化，而在细胞内的分布发生改变，激活的Rac1蛋白在细胞膜的表达增加，并且核内也发现了少量的Rac1蛋白。结论 转移到细胞膜及细胞核内激活的Rac1蛋白参与了辐射诱导细胞的凋亡的过程。
关键词：电离辐射；Rac1；凋亡率
Rac1是Rho蛋白家族中的重要一员，也是细胞内重要的信号分子，它在肿瘤的形成和发展中具有一定的作用[1]。Rac1蛋白在胃癌、脑胶质瘤、胰腺癌等多种恶性肿瘤中高表达[2]。并与肿瘤的分化、预后密切相关，它主要通过影响细胞的凋亡、增殖，细胞的迁移，细胞周期进展，血管形成等多方面来对肿瘤起作用[2～4]。本实验主要研究X线照射后Rac1蛋白在HL-60细胞中的表达变化，为辐射诱导细胞凋亡的机制提供理论基础。
1资料与方法
1.1一般资料 急性白血病HL-60细胞株购自上海中科院细胞研究所，RPMI一1640培养基为HyClone产品，新生牛血清为Gibco产品，碘化丙啶(PI)购自美国Sigma公司，藻红B染色购于上海四季青公司，兔抗Rac1(c-14)多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记二抗、FITC标记羊抗兔IgG二抗、兔源性抗人Actin抗体均购自美国Santa Cruz公司 ......
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