离心力、时间对富血小板血浆中生长因子浓度的影响(2)
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参见附件。
在本试验中,我们尝试了前人所采用的数种二次离心法,发现第一次离心力度如果不够,会导致离心后血浆层较浑浊,血小板聚集层较薄,此时如弃去血浆层,将可能导致的血小板丢失,对PRP的浓度产生一定的影响,即便是第二次离心时用更高的离心力与更长的时间,亦无法提高PRP的浓度。经过我们多次调整离心力度与时间,发现第一次离心条件4℃,900g,10min,第二次离心条件4℃,700g,10min,最为理想。所得到的PRP血小板计数最高。
PRP在凝血酶激活后可释放大量的生长因子[1,2],我们用ELISA来检测其中的较为关键的TGF生长因子,通过对比,发现在第一次离心条件4℃,900g,10min,第二次离心条件4℃,700g,10min,ELISA检测的TGF-β浓度为824.2 ng/ml。这与PRP血小板计数呈正相关。
此外,为保证实验数据的可靠性,我们每种离心方法均由同一人员操作3遍并取平均值。第一次离心后将剩余血浆、血小板移至另一试管的过程也尤为关键。应尽量吸取所有的血小板层,而尽量少吸取最下层的红细胞。第二次离心后,应用10ul的细长移液器吸头吸除最下层剩余的红细胞 ......
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