esp1基因Tet-on载体的构建及在Hela中的可调控性表达(2)
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参见附件。
2.4.Hela细胞染色体结果
2.4.1染色体的形态秋水仙素法处理人淋巴细胞及经过DOX诱导的转染前后的Hela细胞，制备染色体，见图4。
A：淋巴细胞； B：Hela细胞； C：pTet-on-Hela细胞；
D：pTet-on-esp1-Hela细胞
图4转染前后染色体分裂相(姬姆萨染色×1000)
2.4.2染色体的数目DOX浓度以最适诱导浓度200ng/ml诱导后，对正常人淋巴细胞、Hela细胞、pTet-on-Hela细胞染色体影响不明显(P>0.05)，对pTet-on-esp1-Hela细胞染色体影响显著(P<0.01)，见表2。
3讨论
esp1的结构具有进化保守性，其表达的活性蛋白在姐妹染色单体的分离中发挥重要作用。esp1基因定位于VII号染色体，多数为高分子蛋白质，是高度水溶性蛋白，约150-230kDa[4]。
我们成功构建了esp1基因的真核表达载体esp1-pTRE-d2EGFP, 并转染进Hela细胞。通过不同浓度的DOX诱导该表达载体，观察到最适的DOX诱导浓度为200ng/ml ......
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