深低温冷冻法与酶洗法制备兔组织工程同种异体气管支架研究(2)
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1.2.3标本制备 深低温冷冻法[2-3]制备B组气管支架：将取出的气管经生理盐水冲洗，并在200000 U/L青霉素、200 mg/L庆大霉素溶液中浸泡3 min后，放入无菌生物袋中，后浸泡于冷冻保护液中，置于4℃冰箱冷平衡20 min，置于程序降温仪的冷冻箱中程序降温，降温速率-1℃/min，温度降至-80℃后投入-196℃液氮冷冻6~8 w。检测前置于37℃恒温水浴箱内，轻轻摇动。酶洗法制备实验C组气管支架：将标本先置入4℃纯净水中浸泡48 h，在含有4%去氧胆酸钠生理盐水中浸泡3 h，后在含有DNase-I2000KU/L的生理盐水中浸泡3 h，如此循环3个周期，然后浸泡在4℃的PBS 溶液中准备检测。
1.2.4生物力学检测 用直尺测量对照A组、实验B组和实验C组气管的长度；参照Macchiarini等生物力学检测标准，将标本固定在电子实验机上，测出标本的最大拉伸力、破裂力、破裂点，并算出变异率。
1.2.5组织学显微镜观察粘膜上皮细胞 将获取的标本浸泡于福尔马林中24 h，进行脱水、浸纳、蜡块包埋、切片处理后，HE染色，光镜观察。
1.2.6扫面电镜观察细胞外基质完整性 戊二醛固定获取标本，梯度脱水，然后用CO2超临界萃取，喷铂金5 min，扫面电镜观察
1.2.7统计学分析 采用SPSS 16.0软件进行统计分析，定量数据以均数±标准差(x±s)表示，组间比较采用单因素方差分析(ANOVA)，以P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1生物力学检测 各组气管长度均数不相等，差异无统计学意义(P>0.05)。组间两两比较显示，最大拉伸力、破裂力、变异率无统计学意义(P>0 ......
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