泮托拉唑对耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌主动外排泵的抑制作用(2)
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参见附件。
1.3.3平板制备以美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS) 2009年版标准为依据[3]。具体操作如下:采用琼脂平板稀释法，根据 NCCLS抗菌药物敏感性试验操作标准，药物浓度范围应包含耐药、中介和敏感分界点值。将倍比稀释后不同浓度的亚胺培南溶液分别加入灭菌的琼脂平板中，第1~第12号平板中加500μl药液，制作成20ml琼脂平板，第13号平板不加药作为生长对照，分别编号为A1～A13，此时，第1至第12号平板中药物亚胺培南浓度分别为512、256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25μg/ml；同时制备与A1～A13含相同亚胺培南浓度的B1～B13、 C1～C13平板，B1～B13平板含CCCP(终浓度20μg/mL，约100μmol/L)， C1～C13平板含泮托拉唑(终浓度80μg/mL，约180μmol/L)，每个编号的平板各制备37个。
1.3.4药敏试验采用琼脂稀释法。将鲍曼不动杆菌标准株ATCC19606和鲍曼不动杆菌Ab1～36及标准株ATCC19606采用细菌多点接种仪器分别接种于A1～A13、B1～B13、 C1～C13平板中，放入37℃恒温箱中过夜培养,观察并记录ABC三组平板中各个菌株的最小抑菌浓度(即MIC值)。
1.4统计学分析采用SPSS13.0软件进行统计学分析，两样本间的均数比较采用t检验， P<0.05表示差异具有统计学意义。
2结果
2.1外排泵抑制剂对鲍曼不动杆菌的抑制作用鲍曼不动杆菌ATCC19606﹑36株临床分离的鲍曼不动杆菌在对照琼脂平板(不含亚胺培南的A13、B13、C13平板)上均生长良好，说明实验中选择外排泵抑制剂的浓度对鲍曼不动杆菌生长无明显直接抑制作用。
2.2外排泵抑制剂联合亚胺培南对鲍曼不动杆菌MIC的影响36株鲍曼不动杆菌对亚胺培南的MIC几何平均值为20.82μg/ml，加入外排泵抑制剂CCCP后有13株鲍曼不动杆菌MIC值下降4倍以上，被视为外排泵阳性株[4]，其余23株MIC值无明显变化或仅轻度下降，被视为外排泵阴性株 ......
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