不同产地灵芝孢子粉中多糖\总三萜皂苷含量测定(2)
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2.3.2总三萜皂苷的线性关系考察精密吸取三萜皂苷对照品溶液0.1mL,0.2mL,0.3mL,0.4mL,0.5mL,0.6mL,0.7mL分别置于试管中,水浴蒸干,加入5%的香草醛冰醋酸溶液0.2mL和0.8mL的高氯酸,在60℃下反应15min,冰水冷却,添加5mL冰醋酸,在波长555nm处测定各溶液吸光度。以对照品质量(mg)为横坐标,吸光度(A)为纵坐标,绘制标准曲线。实验结果显示三萜皂苷在0.025~0.125mg范围内呈良好的线性关系,相关系数r为0.9996,回归方程为Y=5.8089X+0.011。
2.4精密度试验
2.4.1多糖的精密度考察精密吸取无水葡萄糖对照品溶液1.5mL,按"2.3.1"项下显色方法显色,连续测定吸光度6次。结果显示,精密度试验的RSD为1.42%(n=6),提示仪器精密度良好。
2.4.2总三萜皂苷的精密度考察取标准曲线项下0.2495mg/mL三萜皂苷对照品溶液制备的样品0.4mL,按"2.3.2"项下方法显色,连续测定吸光度5次,求出RSD。结果显示,精密度测定的RSD为1.40%(n=5),提示仪器精密度良好。
2.5稳定性试验
2.5.1多糖的稳定性考察取药材0.5g,精密称定,按"2.1"项下的供试品制备方法制备溶液,精密量取该供试品溶液0.5mL,加入1.0mL的5%苯酚溶液,迅速加入7.0mL浓硫酸,加蒸馏水至刻度,振摇5min,置沸水浴中30min,再冷水浴10min,在反应后10min,15min,25min,35min,45min,60min,在波长492nm下测定吸光度,结果显示:在60min内6次测定值的RSD为0.26%(n=6),表明溶液在1h内稳定,故本实验可以确定在显色后1h内测定。
2.5.2总三萜皂苷的稳定性考察取药材约0.5g,精密称定,按"2.2"项下的供试品制备方法制备溶液,精密量取该供试品溶液0.2mL,水浴蒸干,加入5%的香草醛冰醋酸溶液0.2mL和0.8mL的高氯酸,在60℃下反应15min,冰水冷却 ......
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