EDTA依赖性假性血小板减少3例结果分析
摘要： 目的 分析EDTA-K 抗凝致假性血小板减少的检测结果、原因、纠正的方法，避免临床误诊误治。 方法 对不符合临床情况的血小板严重减少的患者血液进行EDTA和枸橼酸钠仪器法检测和手工稀释液计数法，同时推血片进行染色镜检，比较结果。结论 在工作中进行血细胞分析检测时如遇到不符合临床情况的血小板减少一定要谨慎，采用多种方法排除一切可能的影响，避免医疗差错的发生。
关键词：假性血小板减少； 血小板手工计数；EDTA-PTCP
全自动血细胞分析仪因其具有操作便捷、重复性好、精密度及准确度高、结果稳定等优点，又减少了人工计数各环节中所产生的误差，因而被广泛普及。乙二胺四乙酸(EDTA)因对血细胞计数影响小，在1993年被国际血液学标准化委员会(ICSH)建议为血细胞计数的抗凝剂。但是，EDTA盐可以诱导极0.09%～0.21%血小板(PLT)体外聚集成团[1]，使得PLT计数明显低于实际数值，这就是EDTA依赖性假性PLT减少症(EDTA-PTCP)。EDTA-PTCP本身虽无任何病理学意义，由于发生率低极易被忽视，导致临床误诊误治，严重者甚至有可能进行不必要的PLT输注。下面就我院发现的3例EDTA-PTCP处理分析结果报道如下。
1 资料与方法
1.1一般资料 患者1，男，35岁，右胫骨下端粉碎性骨折于2012年11月9日住我院骨科，11月10日早上9：00术前常规检查，结果如下：ALT：15U/L，AST：28U/L，二对半定性全阴，HCV：阴性，HIV：阴性， PT：12.1s，PT-INR：1.05，APTT：29.6s，FBG：2.48g/l，TT：17.8s；血常规：WBC：6.7×109/L，HB：137g/l，RBC：4.2×1012/L， PLT：13×109/L，医生反映该病人无任何出血倾向，下午4：00重抽血常规复查PLT：14×109/L，11月11日骨科医生请血液科医生进行会诊，血液科医生怀疑该病人为EDTA依赖性假性PLT减少症(EDTA-PTCP)，请我科人员对该患者病房手指采血进行血小板手工计数，我科人员采该患者3管血，1管用EDTA管采静脉血用LH750血细胞分析仪进行分析，PLT为13×109/L，1管用枸橼酸钠抗凝管采静脉血结果为：PLT：129×l09/L，1管采手指血用许汝和稀释液作人工计数，PLT：123×109/L，瑞氏一姬姆萨染色镜检结果显示：EDTA-K2抗凝血血涂片的尾部和周边有聚集的血小板出现，枸橼酸钠抗凝血血涂片血小板散在均匀分布。为此确诊该患者为依赖性假性PLT减少症(EDTA-PTCP)。
患者2，女，45岁。2013年5月8日来我院体检，平日身体无任何不适，无出血症状，其它生化指标及凝血常规正常。血常规检测指标，白细胞：5.8×109 /L，血红蛋白：122 g/L，血小板：20×109 /L，重复多遍，血小板差别不大，做外周血涂片，血小板易见，尾部成片状分布，随即与患者联系，改用枸橼酸钠抗凝剂再次测定，同时做人工计数，血小板数值均在正常范围。
患者3，女，28岁，产妇，孕40w，2013年12月10日来我院生产，产前常规检查，生化指标及凝血常规正常。二对半定性全阴，HCV：阴性，HIV：阴性，血常规检测指标，白细胞：9.6×109 /L，血红蛋白：110g/L，血小板：23×109/L，询问该产妇的主治医生，医生反应该产妇情况良好，无出血症状。我科随即下病房用枸橼酸钠抗凝管采静脉血结果为：PLT：154×l09/L，1管采手指血用许汝和稀释液作人工计数，PLT：165×109/L. 瑞氏一姬姆萨染色镜检结果显示：EDTA-K2抗凝血血涂片的尾部和周边有聚集成片的血小板出现，枸橼酸钠抗凝血血涂片血小板散在均匀分布。
1.2仪器与试剂 仪器与试剂采用贝克曼库尔特LH750全自动五分类血细胞分析仪及其配套试剂。室内全血质控物由贝克曼库尔特有限公司提供。EDTA-K 真空采血管、枸椽酸钠真空采血管(1：9)均来自于BD公司提供。Olympus显微镜，日本NIKoN公司Olympus显微镜。瑞氏-姬姆萨染液和血小板手工稀释液为自配。
1.3方法
1.3.1仪器法 用EDTA-K 真空采血管、枸椽酸钠真空采血管采静脉血2ml于LH750全血细胞分析仪上检测。
1.3.2手工法 采手指血用许汝和稀释液作人工计数。
1.3.3染色法 血涂片用瑞氏-姬姆染液进行染色。
2结果
EDTA盐 可以诱导极少数人血小板体外聚集成团，使得PLT计数明显低于实际数值，从而形成EDTA依赖性假性PLT减少症(EDTA-PTCP)。
3讨论
国内外关于EDTA-PTCP的报道很多，EDTA 致血细胞分析仪血小板计数假性减少的病理机制，到目前为止还不是十分明确，可以确定的是EDTA致血小板假性减少的发生，是在EDTA 盐作为抗凝剂的前提下血液中出现了免疫介导的冷抗血小板自身抗体，它可以与血小板膜表面某种隐匿性抗原结合，同时激活PLA、人磷酯酸C(PLC)、花生四烯酸(AA)、二磷酸腺苷(ADP)、5 羟色胺(5-TH)等活性物质。这些活性物质又能活化血小板纤维蛋白原受体，促使血小板与纤维蛋白原聚集成团，出现使血小板互相凝集现象[2] 。由于目前还无法检测人血液离体后，EDTA盐是否会诱发其PLT聚集，因此，就要求我们检验工作者做血细胞分析时，当血小板计数减少异常怀疑患者属于EDTA-PTCP，通知临床重新用EDTA盐抗凝管采血的同时再采一管枸橼酸钠抗凝管，进行结果的比较，必要时由检验科人员下病房采取手指未梢血做手工计数和涂片染色镜检，排除由EDTA抗凝剂引起干扰，防止错误的结果导致临床误诊，给患者带来不必要的身心负担。
参考文献：
[1] 宓庆梅，施巍宇，郝婉莹，等.EDTA依赖性假性血小板减少症一例[J].中华检验医学杂志，2004，27(10)：719.
[2]张灼锦.EDTA依赖性假性血小板减少[J].中外医学研究，2011，9(36)：123.
编辑/康洁, 百拇医药(张玲玲)
关键词：假性血小板减少； 血小板手工计数；EDTA-PTCP
全自动血细胞分析仪因其具有操作便捷、重复性好、精密度及准确度高、结果稳定等优点，又减少了人工计数各环节中所产生的误差，因而被广泛普及。乙二胺四乙酸(EDTA)因对血细胞计数影响小，在1993年被国际血液学标准化委员会(ICSH)建议为血细胞计数的抗凝剂。但是，EDTA盐可以诱导极0.09%～0.21%血小板(PLT)体外聚集成团[1]，使得PLT计数明显低于实际数值，这就是EDTA依赖性假性PLT减少症(EDTA-PTCP)。EDTA-PTCP本身虽无任何病理学意义，由于发生率低极易被忽视，导致临床误诊误治，严重者甚至有可能进行不必要的PLT输注。下面就我院发现的3例EDTA-PTCP处理分析结果报道如下。
1 资料与方法
1.1一般资料 患者1，男，35岁，右胫骨下端粉碎性骨折于2012年11月9日住我院骨科，11月10日早上9：00术前常规检查，结果如下：ALT：15U/L，AST：28U/L，二对半定性全阴，HCV：阴性，HIV：阴性， PT：12.1s，PT-INR：1.05，APTT：29.6s，FBG：2.48g/l，TT：17.8s；血常规：WBC：6.7×109/L，HB：137g/l，RBC：4.2×1012/L， PLT：13×109/L，医生反映该病人无任何出血倾向，下午4：00重抽血常规复查PLT：14×109/L，11月11日骨科医生请血液科医生进行会诊，血液科医生怀疑该病人为EDTA依赖性假性PLT减少症(EDTA-PTCP)，请我科人员对该患者病房手指采血进行血小板手工计数，我科人员采该患者3管血，1管用EDTA管采静脉血用LH750血细胞分析仪进行分析，PLT为13×109/L，1管用枸橼酸钠抗凝管采静脉血结果为：PLT：129×l09/L，1管采手指血用许汝和稀释液作人工计数，PLT：123×109/L，瑞氏一姬姆萨染色镜检结果显示：EDTA-K2抗凝血血涂片的尾部和周边有聚集的血小板出现，枸橼酸钠抗凝血血涂片血小板散在均匀分布。为此确诊该患者为依赖性假性PLT减少症(EDTA-PTCP)。
患者2，女，45岁。2013年5月8日来我院体检，平日身体无任何不适，无出血症状，其它生化指标及凝血常规正常。血常规检测指标，白细胞：5.8×109 /L，血红蛋白：122 g/L，血小板：20×109 /L，重复多遍，血小板差别不大，做外周血涂片，血小板易见，尾部成片状分布，随即与患者联系，改用枸橼酸钠抗凝剂再次测定，同时做人工计数，血小板数值均在正常范围。
患者3，女，28岁，产妇，孕40w，2013年12月10日来我院生产，产前常规检查，生化指标及凝血常规正常。二对半定性全阴，HCV：阴性，HIV：阴性，血常规检测指标，白细胞：9.6×109 /L，血红蛋白：110g/L，血小板：23×109/L，询问该产妇的主治医生，医生反应该产妇情况良好，无出血症状。我科随即下病房用枸橼酸钠抗凝管采静脉血结果为：PLT：154×l09/L，1管采手指血用许汝和稀释液作人工计数，PLT：165×109/L. 瑞氏一姬姆萨染色镜检结果显示：EDTA-K2抗凝血血涂片的尾部和周边有聚集成片的血小板出现，枸橼酸钠抗凝血血涂片血小板散在均匀分布。
1.2仪器与试剂 仪器与试剂采用贝克曼库尔特LH750全自动五分类血细胞分析仪及其配套试剂。室内全血质控物由贝克曼库尔特有限公司提供。EDTA-K 真空采血管、枸椽酸钠真空采血管(1：9)均来自于BD公司提供。Olympus显微镜，日本NIKoN公司Olympus显微镜。瑞氏-姬姆萨染液和血小板手工稀释液为自配。
1.3方法
1.3.1仪器法 用EDTA-K 真空采血管、枸椽酸钠真空采血管采静脉血2ml于LH750全血细胞分析仪上检测。
1.3.2手工法 采手指血用许汝和稀释液作人工计数。
1.3.3染色法 血涂片用瑞氏-姬姆染液进行染色。
2结果
EDTA盐 可以诱导极少数人血小板体外聚集成团，使得PLT计数明显低于实际数值，从而形成EDTA依赖性假性PLT减少症(EDTA-PTCP)。
3讨论
国内外关于EDTA-PTCP的报道很多，EDTA 致血细胞分析仪血小板计数假性减少的病理机制，到目前为止还不是十分明确，可以确定的是EDTA致血小板假性减少的发生，是在EDTA 盐作为抗凝剂的前提下血液中出现了免疫介导的冷抗血小板自身抗体，它可以与血小板膜表面某种隐匿性抗原结合，同时激活PLA、人磷酯酸C(PLC)、花生四烯酸(AA)、二磷酸腺苷(ADP)、5 羟色胺(5-TH)等活性物质。这些活性物质又能活化血小板纤维蛋白原受体，促使血小板与纤维蛋白原聚集成团，出现使血小板互相凝集现象[2] 。由于目前还无法检测人血液离体后，EDTA盐是否会诱发其PLT聚集，因此，就要求我们检验工作者做血细胞分析时，当血小板计数减少异常怀疑患者属于EDTA-PTCP，通知临床重新用EDTA盐抗凝管采血的同时再采一管枸橼酸钠抗凝管，进行结果的比较，必要时由检验科人员下病房采取手指未梢血做手工计数和涂片染色镜检，排除由EDTA抗凝剂引起干扰，防止错误的结果导致临床误诊，给患者带来不必要的身心负担。
参考文献：
[1] 宓庆梅，施巍宇，郝婉莹，等.EDTA依赖性假性血小板减少症一例[J].中华检验医学杂志，2004，27(10)：719.
[2]张灼锦.EDTA依赖性假性血小板减少[J].中外医学研究，2011，9(36)：123.
编辑/康洁, 百拇医药(张玲玲)