IL—18在结核性胸膜炎胸水中的表达及其意义
摘要：目的 分析和研究IL-18结核性胸膜炎胸水中的表达水平及其临床意义，探讨IL-18与胸水中腺苷脱氨酶含量的相关性。方法 实验组采用酶联免疫吸附试验检测76例结核性胸腔积液，对照组60例恶性胸腔积液患者胸水中IL-18水平及ADA含量。结果 结核性胸膜炎患者胸水中水平显著高于对照组，含量升高和升高存在相关性。结论 结核性胸膜炎可能与IL-18参与相关，联合检测IL-18与ADA含量可以作为临床诊断结核性胸腔积液的有效炎性炎症因子。结论 可能参与了结核性胸膜炎的炎性反应，与联合检测可作为临床诊断结核性胸腔积液的有效炎性标记物。
关键词：结核；恶性，胸腔积液，白细胞介素
IL-18是一种新发现的致炎细胞因子，因为它在结构活化过程受体复合物、信号转导等方面与IL-1β具有相似性，故已经成为逐渐壮大的IL-1细胞因子家族的一个新成员[1-2]。对新生鼠HIBD模型的研究发现，损伤侧脑细胞IL-18 mRNA和蛋白的表达在再灌注后1～14d逐渐增多， ELISA测定证实缺氧缺血后3d和6d，活性IL-18分别增加了37%和36%[3]。mIL-18和h IL-18均具有IL-1特征样结构，即FX(12)FX(6)FL。这种空间结构上的相似性提示IL-18与IL-1可能识别相同的受体成分，有的学者推测IL-18基因可能定位于IL-1基因附近，位于2913-2921处，甚至认为IL-18和IL-1可能来自同一原始基因，然而从氨基酸序列比较，rIL-18与IL-1β和IL-1的同源性仅为18%和15%，且IL-18与IL-1的生物学功能相差很大，尤其对NK细胞的调节作用，IL-18参与了炎症反应与免疫调节[4-5]。结核分枝杆菌感染研究证实IL-18在结核性杆菌感染的免疫中起重要作用，然而目前有关的结核杆菌性胸膜炎的关联研究甚少。
1 资料与方法
1.1一般资料 选取2010年1月～2013年12月我院门诊收入住院的176例胸腔积液患者接受相关的诊断程序。通过体格检查以及追问病史，行相关的辅助检查并接受临床治疗观察，最后又136例诊断为结核性胸膜炎和癌性胸腔积液的患者纳入本次实验研究。选取住院收治的初次结核性胸膜炎患者76例为试验组，其中男44例，女32例，年龄在15～81岁之间，诊断标准：临床症状(盗汗、低热、咳嗽、咳血等)结合X线表现，CT诊断以及胸水常规、生化，胸水中PCR-TB-DNA，红细胞沉降率，PPD实验等实验室检查，排除近3个月使用免疫抑制剂者，有其他肺部疾病患者，有严重心脑、肾、血管疾病，血液系统疾病患者，选取同时间段我院收住的恶性胸腔积液患者60例作为对照组，其中男38例，女22例，年龄在41～82岁。通过追问病史及相关肿瘤标记物、细胞学检验在胸腔积液中找到癌细胞或组织活检证实为恶性胸腔积液。所有患者于收集胸腔积液标本时未曾接受抗结核，抗癌，糖皮质激素或其他非激素抗炎药物治疗。
1.2方法 所有研究对象在住院24h内采用标准的胸腔穿刺术收集胸腔积液标本。胸腔积液标本以5000转/min，离心5min，取上清液置-80摄氏度冰箱冻存，待测IL-18含量。样本收集完毕后，取出冻存的胸腔积液，应用酶联免疫吸附试验法测定患者胸腔穿刺液中IL-18的含量。试剂盒采用德国MF公司进口的IL-18世纪盒，操作过程严格按照试剂盒说明进行。抽取的2ml新鲜胸腔积液在全自动化分析仪测定ADA含量，请检验科协助检测。
1.3统计学方法 以上所有数据均行SPSS16.0统计软件包进行统计学分析，计量资料结果以均数±标准差表示，对于正态分布的方差齐的变量采取t检验进行两组间的比较。IL-18与ADA的相关性分析采用Spearman相关分析，以P<0.05为其差异有统计学意义。
2 结果
2.1 IL-18与ADA的水平含量 本次研究数据表明结核性胸腔积液组检测到IL-18，比在恶性胸腔积液组中检测的IL-18水平更高(Z=-6.92，其差异有统计学意义，P<0.05)。两组受试者ADA含量，恶性胸腔积液组胸水ADA含量明显低于结核性胸腔积液组胸水(Z=-6.92，其差异有统计学意义，P<0.05)。
2.2IL-18与ADA的相关性分析：本次实验证实IL-18在胸腔积液中与ADA的含量存在显著的正相关性(r=0.0682，P<0.05)。
3 讨论
IL-18是一种新发现的致炎细胞因子，因为它在结构活化过程受体复合物、信号转导等方面与IL-1β具有相似性，故已经成为逐渐壮大的IL-1细胞因子家族的一个新成员[6-7]。对新生鼠HIBD模型的研究发现，损伤侧脑细胞IL-18 mRNA和蛋白的表达在再灌注后1～14d逐渐增多， ELISA测定证实缺氧缺血后3d和6d，活性IL-18分别增加了37%和36%[4]。mIL-18和h IL-18均具有IL-1特征样结构，即FX(12)FX(6)FL。这种空间结构上的相似性提示IL-18与IL-1可能识别相同的受体成分，有的学者推测IL-18基因可能定位于IL-1基因附近，位于2913-2921处，甚至认为IL-18和IL-1可能来自同一原始基因，然而从氨基酸序列比较，rIL-18与IL-1β和IL-1的同源性仅为18%和15%，且IL-18与IL-1的生物学功能相差很大，尤其对NK细胞的调节作用[8]。腺苷脱氨酶(EC：3.5.4.4adenosinedeaminaseADA)是嘌呤核苷代谢中重要的酶类，属于巯基酶，每分子至少含2个活性巯基，其活性能对氯汞甲酸完全抑制[8]。ADA能催化腺嘌呤核苷转变为次黄嘌呤核苷，再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤，其代谢缓和终产物为尿酸[9]。
本次实验研究表明，结核性胸膜炎患者胸水中IL-18含量显著高于恶性胸腔积液组，也可能由于IL-18主要诱发细胞的免疫炎症，有诱使INF-r产生，明显增加了Th1型免疫反应功能。在本次实验中也说明胸腔积液中IL-18和ADA正向关联，再次证实胸膜腔局部的T淋巴细胞在抗原作用下被激活产生释放ADA、IL-18，两者共同在免疫反应中发挥免疫效应的作用，联合检测ADA与IL18可以作为区别结核性和恶性胸腔积液的有力生化指标。
参考文献：
[1]孙波，明安宇，薛林福.胸水多指标检测在结核性及癌性胸膜炎鉴别诊断中的价值[J].中华结核和呼吸杂志，1987，10(l)：13.
[2]楼稚芳，李欣.IL-18检测对癌性与结核性胸腔积液的鉴别诊断价值[J].11备床肺科杂志，2007，12(8)：870-871.
[3]孙卫民，王惠琴.细胞因子研究方法学536-539页[M].北京：人民卫生出版社，1999.
[4]田庚.ADA在鉴别良恶性胸腔积液中的应用[J].临床肺科杂志，2009，14(9)：1190.
[5]常贺，李刚，张乐.IL-18、IL-12及相关因子在大鼠实验性自身免疫心肌炎心肌中的表达时程和特征[J].2010，26(6)：502-506.
[6]陈丹，王宏，朱中松，等.ADA基因合成、原核表达及鉴定[J].免疫学杂志，2010，25(4)：469-472.
[7]吴欣.IL-12和IL-18与I型辅助T细胞应答[J].国外医学：免疫学分册，2012，25(5)：244-246.
[8]熊盛道，徐国鹏，熊维宁.IL-18对结核性肺炎小鼠Th1/Th2免疫应答的影响[J].免疫学杂志，2011，25(2)：76-79.
[9]李壮，龙显科.胸腹水生化指标的临床应用[J].右江民族医学院学报，2012，20(3)：452-454.
编辑/王敏, 百拇医药(张勤)
关键词：结核；恶性，胸腔积液，白细胞介素
IL-18是一种新发现的致炎细胞因子，因为它在结构活化过程受体复合物、信号转导等方面与IL-1β具有相似性，故已经成为逐渐壮大的IL-1细胞因子家族的一个新成员[1-2]。对新生鼠HIBD模型的研究发现，损伤侧脑细胞IL-18 mRNA和蛋白的表达在再灌注后1～14d逐渐增多， ELISA测定证实缺氧缺血后3d和6d，活性IL-18分别增加了37%和36%[3]。mIL-18和h IL-18均具有IL-1特征样结构，即FX(12)FX(6)FL。这种空间结构上的相似性提示IL-18与IL-1可能识别相同的受体成分，有的学者推测IL-18基因可能定位于IL-1基因附近，位于2913-2921处，甚至认为IL-18和IL-1可能来自同一原始基因，然而从氨基酸序列比较，rIL-18与IL-1β和IL-1的同源性仅为18%和15%，且IL-18与IL-1的生物学功能相差很大，尤其对NK细胞的调节作用，IL-18参与了炎症反应与免疫调节[4-5]。结核分枝杆菌感染研究证实IL-18在结核性杆菌感染的免疫中起重要作用，然而目前有关的结核杆菌性胸膜炎的关联研究甚少。
1 资料与方法
1.1一般资料 选取2010年1月～2013年12月我院门诊收入住院的176例胸腔积液患者接受相关的诊断程序。通过体格检查以及追问病史，行相关的辅助检查并接受临床治疗观察，最后又136例诊断为结核性胸膜炎和癌性胸腔积液的患者纳入本次实验研究。选取住院收治的初次结核性胸膜炎患者76例为试验组，其中男44例，女32例，年龄在15～81岁之间，诊断标准：临床症状(盗汗、低热、咳嗽、咳血等)结合X线表现，CT诊断以及胸水常规、生化，胸水中PCR-TB-DNA，红细胞沉降率，PPD实验等实验室检查，排除近3个月使用免疫抑制剂者，有其他肺部疾病患者，有严重心脑、肾、血管疾病，血液系统疾病患者，选取同时间段我院收住的恶性胸腔积液患者60例作为对照组，其中男38例，女22例，年龄在41～82岁。通过追问病史及相关肿瘤标记物、细胞学检验在胸腔积液中找到癌细胞或组织活检证实为恶性胸腔积液。所有患者于收集胸腔积液标本时未曾接受抗结核，抗癌，糖皮质激素或其他非激素抗炎药物治疗。
1.2方法 所有研究对象在住院24h内采用标准的胸腔穿刺术收集胸腔积液标本。胸腔积液标本以5000转/min，离心5min，取上清液置-80摄氏度冰箱冻存，待测IL-18含量。样本收集完毕后，取出冻存的胸腔积液，应用酶联免疫吸附试验法测定患者胸腔穿刺液中IL-18的含量。试剂盒采用德国MF公司进口的IL-18世纪盒，操作过程严格按照试剂盒说明进行。抽取的2ml新鲜胸腔积液在全自动化分析仪测定ADA含量，请检验科协助检测。
1.3统计学方法 以上所有数据均行SPSS16.0统计软件包进行统计学分析，计量资料结果以均数±标准差表示，对于正态分布的方差齐的变量采取t检验进行两组间的比较。IL-18与ADA的相关性分析采用Spearman相关分析，以P<0.05为其差异有统计学意义。
2 结果
2.1 IL-18与ADA的水平含量 本次研究数据表明结核性胸腔积液组检测到IL-18，比在恶性胸腔积液组中检测的IL-18水平更高(Z=-6.92，其差异有统计学意义，P<0.05)。两组受试者ADA含量，恶性胸腔积液组胸水ADA含量明显低于结核性胸腔积液组胸水(Z=-6.92，其差异有统计学意义，P<0.05)。
2.2IL-18与ADA的相关性分析：本次实验证实IL-18在胸腔积液中与ADA的含量存在显著的正相关性(r=0.0682，P<0.05)。
3 讨论
IL-18是一种新发现的致炎细胞因子，因为它在结构活化过程受体复合物、信号转导等方面与IL-1β具有相似性，故已经成为逐渐壮大的IL-1细胞因子家族的一个新成员[6-7]。对新生鼠HIBD模型的研究发现，损伤侧脑细胞IL-18 mRNA和蛋白的表达在再灌注后1～14d逐渐增多， ELISA测定证实缺氧缺血后3d和6d，活性IL-18分别增加了37%和36%[4]。mIL-18和h IL-18均具有IL-1特征样结构，即FX(12)FX(6)FL。这种空间结构上的相似性提示IL-18与IL-1可能识别相同的受体成分，有的学者推测IL-18基因可能定位于IL-1基因附近，位于2913-2921处，甚至认为IL-18和IL-1可能来自同一原始基因，然而从氨基酸序列比较，rIL-18与IL-1β和IL-1的同源性仅为18%和15%，且IL-18与IL-1的生物学功能相差很大，尤其对NK细胞的调节作用[8]。腺苷脱氨酶(EC：3.5.4.4adenosinedeaminaseADA)是嘌呤核苷代谢中重要的酶类，属于巯基酶，每分子至少含2个活性巯基，其活性能对氯汞甲酸完全抑制[8]。ADA能催化腺嘌呤核苷转变为次黄嘌呤核苷，再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤，其代谢缓和终产物为尿酸[9]。
本次实验研究表明，结核性胸膜炎患者胸水中IL-18含量显著高于恶性胸腔积液组，也可能由于IL-18主要诱发细胞的免疫炎症，有诱使INF-r产生，明显增加了Th1型免疫反应功能。在本次实验中也说明胸腔积液中IL-18和ADA正向关联，再次证实胸膜腔局部的T淋巴细胞在抗原作用下被激活产生释放ADA、IL-18，两者共同在免疫反应中发挥免疫效应的作用，联合检测ADA与IL18可以作为区别结核性和恶性胸腔积液的有力生化指标。
参考文献：
[1]孙波，明安宇，薛林福.胸水多指标检测在结核性及癌性胸膜炎鉴别诊断中的价值[J].中华结核和呼吸杂志，1987，10(l)：13.
[2]楼稚芳，李欣.IL-18检测对癌性与结核性胸腔积液的鉴别诊断价值[J].11备床肺科杂志，2007，12(8)：870-871.
[3]孙卫民，王惠琴.细胞因子研究方法学536-539页[M].北京：人民卫生出版社，1999.
[4]田庚.ADA在鉴别良恶性胸腔积液中的应用[J].临床肺科杂志，2009，14(9)：1190.
[5]常贺，李刚，张乐.IL-18、IL-12及相关因子在大鼠实验性自身免疫心肌炎心肌中的表达时程和特征[J].2010，26(6)：502-506.
[6]陈丹，王宏，朱中松，等.ADA基因合成、原核表达及鉴定[J].免疫学杂志，2010，25(4)：469-472.
[7]吴欣.IL-12和IL-18与I型辅助T细胞应答[J].国外医学：免疫学分册，2012，25(5)：244-246.
[8]熊盛道，徐国鹏，熊维宁.IL-18对结核性肺炎小鼠Th1/Th2免疫应答的影响[J].免疫学杂志，2011，25(2)：76-79.
[9]李壮，龙显科.胸腹水生化指标的临床应用[J].右江民族医学院学报，2012，20(3)：452-454.
编辑/王敏, 百拇医药(张勤)
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