二苯乙烯苷对脂肪变性HEPG2细胞影响的实验研究(1)
二苯乙烯苷对脂肪变性HEPG2细胞影响的实验研究,脂肪变性肝细胞,甘油三酯,ACCmRNA
摘要:目的 建立油酸诱导脂肪肝离体细胞模型,考察二苯乙烯苷对其干预效果及相关机制。方法 以离体人肝癌HepG2细胞为研究对象,以随机对照方式进行研究。实验一:用0.7mM、1.4mM、2.8mM三种不同浓度油酸和10%(V/V)胎牛血清的RPMI-1640完全培养基孵育HepG2细胞24h,制备肝细胞脂肪变性模型。油红O染色观察每组细胞形态和细胞内脂滴的形成情况,分别检测细胞内甘油三酯的含量,确定油酸造模的最佳作用浓度。实验二:实验分为6组:第1组为空白组,即正常肝细胞组;第2组为模型组,即脂变肝细胞组;第3组至第6组在脂变细胞中分别加入不等量二苯乙烯苷,使二苯乙烯苷终浓度分别为2uM、4uM、8uM和16uM。每组加药后继续孵育24h。油红O染色观察每组细胞形态和细胞内脂滴的形成情况,检测细胞内甘油三酯、总蛋白的含量,培养基中ALT、AST含量。实验三:实时定量RT-PCR法检测每组肝细胞乙酰CoA羧化酶mRNA水平的表达。实验数据以 表示,用SPSS13.0统计软件对数据进行分析,P<0.05说明有统计学差异 ......
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