2240例体检中心女性HPV感染状况及基因型分析(2)
1.1.2仪器 选择美国ABI公司生产的ABI7500基因扩增仪;使用韩国FINEPCR公司提供的Combi-12H分子杂交箱。1.1.3需要的试剂 ①主要试剂:规格为20μl/每管的PCR反应液,浓度为30%的H2O2,裂解液、矿物油、TMB、膜条、POD;②其他试剂:pH7.0的20倍SSC,pH7.0的10%SDS、pH为5.0的1M柠檬酸钠,再配制成A、B、C三中液体试剂,其中,A液主要由2倍SSC、0.1%SDS组成,pH值为7.4;B液主要含0.5倍SSC、0.1%SDS,pH值为7.4);C液主要含0.1moM柠檬酸钠,pH值为5.4,)。另外需要配置新鲜的显色液,显色液中主要含有3%的H2O2 2μl、TMB 1ml及19ml的C液。所需要试剂均来源于深圳亚能生物技术有限公司,其试剂的配置方法及使用方法可以参照试剂说明书来应用。
1.2方法
1.2.1处理样本 充分洗脱宫颈刷,取1ml含样本的细胞保存液置入容量为1.5ml的离心管内,对样本以13000转/min的转速来离心,离心时间为10min,除去上清液,留取管底沉淀物 ......
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