转染微小RNA—132对骨肉瘤SaOS—2细胞生长和凋亡的作用(2)
2.1 一般资料 34例骨肉瘤组织标本取自2008年06月~2013年9月在我院骨外科行手术切除的骨肉瘤及对应的癌旁正常组织手术标本。其中男性11例,女性23例,年龄12~45岁,中位年龄23.6岁,所有病例均术后经病理检查证实为骨肉瘤,术前均未行放化疗,全部标本取材后迅速置于- 80℃冰箱保存备用。2.2 主要试剂 胎牛血清、RPMI-1640培养基和含0.25%EDTA胰蛋白酶购自美国Gibco公司;CCK-8试剂盒和BCA蛋白浓度测定试剂盒购自南京凯基生物科技发展有限公司;Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒购自美国Sigma公司;Mucin-4、HER-2、p-FAK、FAK和β-actin抗体购自美国Santa Cruz公司;CyTM3标记miRNA-132 mimic购自锐博生物科技有限公司;SYBR实时荧光定量试剂盒、Hairpin-itTM miRNAs qPCR Quantitation Kit、U6 snRNA real-time PCR Normalization Kit和脂质体LipfectamineTM 2000购自美国Invitrogen公司 ......
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