1.2标本采集及细菌培养 对疑诊为BM的患儿在入院后严格无菌操作采集脑脊液，增菌培养后化种于血培养基和真菌培养基上，35℃培养16～20h。

    1.3菌株鉴定 对有细菌生长者挑取菌落，经革兰染色初步分类后，以法国生物梅里埃公司的细菌自动鉴定系统--VITEK系统的GPI卡和GNI卡进行菌株鉴定。

    1.4药敏试验 药敏试验和超广谱β内酰胺酶(extended spectrum β lactamases，ESBL)检测采用VITEK系统的药敏卡完成，小部分无鉴定卡和相应药敏卡的细菌采用纸片扩散法手工完成药敏试验。实验过程中采用相应菌株的标准株作为质量控制，并参照国际临床和实验室标准化研究所的指南进行操作和结果判读。

    2 结果

    2.1分离细菌的种类 脑脊液细菌培养阳性共32例，分离病原菌32株，其中革兰阳性菌27株，占84.38%，包括凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、微球菌、无乳链球菌，革兰阴性菌5例，占15.63%，分别是大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌、铜绿假单胞菌、沙门菌D群及脑膜炎奈瑟菌各1株 ......