利用CRISPR/Cas9建立肠癌抑制基因Mindin的稳定敲除细胞株(2)
2.3 Mindin基因敲除单克隆细胞的获得 根据细胞库敲除的情况，我们挑选了sgRNA位点3的细胞库进行单克隆分选。用培养基稀释的细胞培养14天后，于显微镜下挑选正确的单克隆提取基因组DNA，利用单克隆测序引物TA1或TA2进行测序。其中所获得的第23号单克隆缺少了10bp，是一株Mindin基因敲除并可稳定遗传的细胞。而所获得的第12号单克隆缺失了3bp，是一种不会改变后续阅读框的突变，可以用于当作对照组细胞株，见图1。图1 Mindin敲除的单克隆细胞基因组测序结果
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基因组编辑是研究基因功能以及进行基因治疗的重要手段 ......
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