HPLC测定益坤宁片中阿魏酸的含量(2)
6 稳定性试验
取供试品溶液，室温放置，按上述方法分别在第0、2、5、8、12、24 h测定6次，结果阿魏酸峰面积的RSD值为0.5%，表明该溶液在24 h内基本稳定。
7 回收率试验
取已知含量的样品(阿魏酸含量： 0.39mg/g)九份，每份0.5g，分别按80%、100%和120%加入对照品，按制备样品溶液的方法制备，依法测定，计算加样回收率
8 专属性验证
阴性溶液的制备：取按处方比例称取除当归、川芎外的其他药材，按益坤宁片的制备工艺及供试品制备方法制成阴性对照溶液。取对照品溶液，阴性对照品溶液与供试品溶液共同进高效液相进行测定.
9 样品测定
取4批样品，按2.3制备供试品溶液，分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液各10 μl，注入高效液相色谱仪，测定，计算
10 讨论
10.1检测过程中通过参考文献及对照品溶液的全波长扫描，对检测波长进行了选择，以溶剂为空白在200～400 nm范围内绘制吸收光谱图。实验表明，阿魏酸在322 nm具最大吸收，且用322 nm为检测波长时，阿魏酸检测灵敏度高，杂质峰较少，基线较平稳，杂质均不干扰测定，故选择322 nm为其检测波长。
10.2提取方法的考察 采用正交试验法优化提取方法，考察提取溶剂、提取时间、提取方法及溶剂用量，4个因素对提取结果的影响。最终确定提取方案为：25 ml的稀乙醇，超声处理30 min[1]。
参考文献：
[1]张秀丽.HPLC法测定川芎中阿魏酸的含量[J].中国药事，2009，23(5)：469-470.
[2]林斯民，林翠勤，林裕平，等.HPLC法测定当归片中阿魏酸的含量[J].中国中医药现代远程教育，2009，7(2)：119-120.
[3]梁娜，孙少平，罗跃娥，等.阿魏酸的研究进展[J].黑龙江中医药，2009，(3)：39-40.
[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京：化学工业出版社，2015：40-41.
[5]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京：化学工业出版社，2015：133-134. 编辑/翟辰万, 百拇医药(陈美玲 刘琴 张倩 张娟 吴翠 孙艳丽 高晓艳)
取供试品溶液，室温放置，按上述方法分别在第0、2、5、8、12、24 h测定6次，结果阿魏酸峰面积的RSD值为0.5%，表明该溶液在24 h内基本稳定。
7 回收率试验
取已知含量的样品(阿魏酸含量： 0.39mg/g)九份，每份0.5g，分别按80%、100%和120%加入对照品，按制备样品溶液的方法制备，依法测定，计算加样回收率
8 专属性验证
阴性溶液的制备：取按处方比例称取除当归、川芎外的其他药材，按益坤宁片的制备工艺及供试品制备方法制成阴性对照溶液。取对照品溶液，阴性对照品溶液与供试品溶液共同进高效液相进行测定.
9 样品测定
取4批样品，按2.3制备供试品溶液，分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液各10 μl，注入高效液相色谱仪，测定，计算
10 讨论
10.1检测过程中通过参考文献及对照品溶液的全波长扫描，对检测波长进行了选择，以溶剂为空白在200～400 nm范围内绘制吸收光谱图。实验表明，阿魏酸在322 nm具最大吸收，且用322 nm为检测波长时，阿魏酸检测灵敏度高，杂质峰较少，基线较平稳，杂质均不干扰测定，故选择322 nm为其检测波长。
10.2提取方法的考察 采用正交试验法优化提取方法，考察提取溶剂、提取时间、提取方法及溶剂用量，4个因素对提取结果的影响。最终确定提取方案为：25 ml的稀乙醇，超声处理30 min[1]。
参考文献：
[1]张秀丽.HPLC法测定川芎中阿魏酸的含量[J].中国药事，2009，23(5)：469-470.
[2]林斯民，林翠勤，林裕平，等.HPLC法测定当归片中阿魏酸的含量[J].中国中医药现代远程教育，2009，7(2)：119-120.
[3]梁娜，孙少平，罗跃娥，等.阿魏酸的研究进展[J].黑龙江中医药，2009，(3)：39-40.
[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京：化学工业出版社，2015：40-41.
[5]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京：化学工业出版社，2015：133-134. 编辑/翟辰万, 百拇医药(陈美玲 刘琴 张倩 张娟 吴翠 孙艳丽 高晓艳)