丙肝核心抗原和丙肝抗体联合检测在丙肝感染诊断中的临床价值(1)
摘要：目的 探讨丙肝核心抗原(HCV-cAg)和丙肝抗体(HCV-Ab)联合检测对提高丙肝患者早期感染诊断中临床价值。方法 对324例临床标本同时检测HCV-cAg和HCV-Ab，并对HCV-cAg阳性标本和HCV-cAg阴性且HCV-Ab阴性标本进一步检测丙肝RNA(HCV-RNA)。结果 单独检测HCV-Ab，丙肝的检出率为22.5%，联合检测HCV-cAg和HCV-Ab则丙肝的检出率为27.8%，在73例HCV-Ab阳性的标本中，HCV-cAg的阳性率达41.1%；在251例HCV-Ab阴性的标本中，HCV-cAg阳性的例数为17例，丙肝的漏诊率达6.8%；如果以HCV-RNA检测结果为标准，则HCV-cAg与HCV-RNA检测结果的符合率达93.6%，特异性达98.3%。结论 HCV-cAg和HCV-RNA具有高度的相关性，联合检测HCV-cAg核心抗原和HCV-Ab抗体是防范HCV广泛传播和诊疗的有效手段。
关键词：丙型肝炎；丙肝核心抗原；丙肝抗体；丙肝RNA，酶联免疫法
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根据统计显示，目前全球丙肝的感染人数约为2亿人，而我国丙肝感染率大概为3.2%[1]。约60%的丙肝感染都是无症状的，发病隐蔽，易转慢性至纤维化，所以早期正确诊断病毒感染，防止病毒继续传播尤显重要。丙肝筛查的常用方法是检测丙肝抗体，其次是检测丙肝核心抗原和丙肝RNA，HCV-RNA由于其价格昂贵限制其广泛使用；根据国内外近十几年的许多研究报道显示，HCV-cAg的灵敏度与HCV-RNA接近[2]，且价格便宜，所以其使用所以其应用越来越受到重视。本文将对我院高危丙肝患者首次诊查的血清标本进行HCV-cAg、HCV-Ab和HCV-RNA检测，分析HCV-cAg和HCV-Ab的联合检测在提高丙肝感染诊断中的价值。
1 资料与方法
1.1一般资料 所有样本来自我院2014年1月～2015年1月的消化内科、传染科、血透科、肿瘤科和急诊科等共计324例，年龄分布：16～85岁，中位年龄：42岁，其中男性：185例，女性139例，所有患者标本均为首次就诊所采集的标本。
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1.2试剂和仪器 丙肝抗体试剂来自厦门英科新创公司，丙肝核心抗原试剂来自湖南景达生物公司，HCVRNA核酸扩增PCR检测试剂由广州达安基因公司提供，所用内标质控品购置卫生部临检中心，达安基因DA7600荧光扩增仪PCR一台，雅培公司I2000全自动免疫分析仪一台。
1.3分析检测方法 丙肝抗体和丙肝核心抗原检测采用标准酶联免疫吸附试验法(ELISA)，按全自动免疫分析仪SOP文书标准化操作，丙肝RNA检测采用DA7600荧光扩增PCR仪，所有检测都与质控品同步进行确保结果准确可靠。324例临床标本同时检测HCV-Ab、HCV-cAg和HCV-RNA；对HCV-cAg检测结果与HCV-RNA检测结果进行比较分析。
1.4结果判定 酶免法结果判定标准以S/CO≥1为阳性，PCR结果判定标准为≥500IU为阳性。
1.5统计学方法 采用SPSS 18.0对结果进行统计学分析，以P>0.05为差异有统计学意义。
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2 结果
2.1 324例可疑标本检测结果分析 本文对324例可疑标本分别进行HCV-cAg核心抗原、HCV-Ab抗体和HCV-RNA检测，结果显示，HCV-Ab抗体阳性标本73例，阳性率22.5%(73/324)；HCV-cAg核心抗原阳性47例；在HCV-cAg、HCV-Ab均为阴性的234例标本和47例HCV-cAg核心阳性的标本中HCV-RNA阳性占48例。
2.2丙肝核心抗原和丙肝RNA检测结果比较抗原 在47例HCV-cAg核心阳性阳性的标本中，丙肝RNA的阳性例数为44例，与丙肝RNA检测结果的符合率达93.6%(44/47)；在234例丙肝核心抗原和丙肝抗体检测均为阴性的标本中，丙肝RNA的阳性例数为4例。
2.3 丙肝核心抗原和丙肝抗体联合检测结果比较 在73例丙肝抗体阳性的标本中，丙肝核心抗原阳性的例数为30例；丙肝核心抗原的阳性率达41.1%(30/73)；在251例标本丙肝抗体阴性的标本中，丙肝核心抗原阳性的例数为17例，如果仅检测丙肝抗体，则将有17例丙肝漏诊，漏诊率达6.8%(17/251)，HCV-Ab阳性73例与漏诊丙肝17例之和为90例，联合检测HCV-cAg核心抗原和HCV-Ab抗体所得丙肝阳性率为27.8%(90/324)。两者相比较差异有统计学意义(P<0.05)。
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3 讨论
HCV病毒呈球形， 直径小于80 nm，隶属于黄病毒科，大约有9.6 Kbp，其为单股正链RNA病毒。 HCV病毒具有显著异源性和高度可变性，HCV基因组各部位的变异程度不相一致；HCV-cAg核心抗原是由HCV最保守的C区编码基因产生，研究显示，HCV-cAg核心抗原检查对HCV早期感染诊断相依性高[3-4]。目前实验室检测HCV-Ab抗体所包被的基因抗原是由基因工程制备的第三代抗原，主要是衣壳蛋白，NS2，NS3，NS4和NS5等，它的敏感度和特异性都较第二代抗原大幅提高，但是由于厂家基因抗原生产工艺的不同以及包被基因抗原比例不同，导致各实验室检出丙肝抗体的阳性率不完全相同，这样容易导致检出丙肝抗体的漏诊或误诊，因此对在实验室中只查HCV-Ab抗体可能与临床表现不符。采用HCVRNA检查，要求实验室建制严格且成本高，限制了在基础实验室使用。随着第四代基因技术的成熟，HCV-cAg核心抗原的检测也更加广泛的引用于临床。
本文研究显示，在47例HCV-cAg核心抗原阳性标本组中，用HCVRNA检出阳性44例，HCV-cAg检测率与HCVRNA检出率相符为93.6%，这与Akihiko Kato[5]和Keslia[6]等结论相似。因为根据病毒感染规律，其HCV-cAg核心抗原在HCV感染后大约14～70 d就可以在血液中检测到[7]，它在体内产生的时间相较HCVRNA出现约晚1 d[8]，而当HCV-Ab抗体出现后，原来出现的HCV-cAg核心抗原等会被抗体中和消失。但也有一些免疫力缺陷患者从不产生HCV-Ab抗体，导致HCV-Ab抗体可以在患者体内长时间存在。所以HCV-cAg核心抗原检测可以防止早期丙肝感染患者和免疫缺陷感染丙肝的漏诊。, 百拇医药(连丽琴)
关键词：丙型肝炎；丙肝核心抗原；丙肝抗体；丙肝RNA，酶联免疫法
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根据统计显示，目前全球丙肝的感染人数约为2亿人，而我国丙肝感染率大概为3.2%[1]。约60%的丙肝感染都是无症状的，发病隐蔽，易转慢性至纤维化，所以早期正确诊断病毒感染，防止病毒继续传播尤显重要。丙肝筛查的常用方法是检测丙肝抗体，其次是检测丙肝核心抗原和丙肝RNA，HCV-RNA由于其价格昂贵限制其广泛使用；根据国内外近十几年的许多研究报道显示，HCV-cAg的灵敏度与HCV-RNA接近[2]，且价格便宜，所以其使用所以其应用越来越受到重视。本文将对我院高危丙肝患者首次诊查的血清标本进行HCV-cAg、HCV-Ab和HCV-RNA检测，分析HCV-cAg和HCV-Ab的联合检测在提高丙肝感染诊断中的价值。
1 资料与方法
1.1一般资料 所有样本来自我院2014年1月～2015年1月的消化内科、传染科、血透科、肿瘤科和急诊科等共计324例，年龄分布：16～85岁，中位年龄：42岁，其中男性：185例，女性139例，所有患者标本均为首次就诊所采集的标本。
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1.2试剂和仪器 丙肝抗体试剂来自厦门英科新创公司，丙肝核心抗原试剂来自湖南景达生物公司，HCVRNA核酸扩增PCR检测试剂由广州达安基因公司提供，所用内标质控品购置卫生部临检中心，达安基因DA7600荧光扩增仪PCR一台，雅培公司I2000全自动免疫分析仪一台。
1.3分析检测方法 丙肝抗体和丙肝核心抗原检测采用标准酶联免疫吸附试验法(ELISA)，按全自动免疫分析仪SOP文书标准化操作，丙肝RNA检测采用DA7600荧光扩增PCR仪，所有检测都与质控品同步进行确保结果准确可靠。324例临床标本同时检测HCV-Ab、HCV-cAg和HCV-RNA；对HCV-cAg检测结果与HCV-RNA检测结果进行比较分析。
1.4结果判定 酶免法结果判定标准以S/CO≥1为阳性，PCR结果判定标准为≥500IU为阳性。
1.5统计学方法 采用SPSS 18.0对结果进行统计学分析，以P>0.05为差异有统计学意义。
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2 结果
2.1 324例可疑标本检测结果分析 本文对324例可疑标本分别进行HCV-cAg核心抗原、HCV-Ab抗体和HCV-RNA检测，结果显示，HCV-Ab抗体阳性标本73例，阳性率22.5%(73/324)；HCV-cAg核心抗原阳性47例；在HCV-cAg、HCV-Ab均为阴性的234例标本和47例HCV-cAg核心阳性的标本中HCV-RNA阳性占48例。
2.2丙肝核心抗原和丙肝RNA检测结果比较抗原 在47例HCV-cAg核心阳性阳性的标本中，丙肝RNA的阳性例数为44例，与丙肝RNA检测结果的符合率达93.6%(44/47)；在234例丙肝核心抗原和丙肝抗体检测均为阴性的标本中，丙肝RNA的阳性例数为4例。
2.3 丙肝核心抗原和丙肝抗体联合检测结果比较 在73例丙肝抗体阳性的标本中，丙肝核心抗原阳性的例数为30例；丙肝核心抗原的阳性率达41.1%(30/73)；在251例标本丙肝抗体阴性的标本中，丙肝核心抗原阳性的例数为17例，如果仅检测丙肝抗体，则将有17例丙肝漏诊，漏诊率达6.8%(17/251)，HCV-Ab阳性73例与漏诊丙肝17例之和为90例，联合检测HCV-cAg核心抗原和HCV-Ab抗体所得丙肝阳性率为27.8%(90/324)。两者相比较差异有统计学意义(P<0.05)。
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3 讨论
HCV病毒呈球形， 直径小于80 nm，隶属于黄病毒科，大约有9.6 Kbp，其为单股正链RNA病毒。 HCV病毒具有显著异源性和高度可变性，HCV基因组各部位的变异程度不相一致；HCV-cAg核心抗原是由HCV最保守的C区编码基因产生，研究显示，HCV-cAg核心抗原检查对HCV早期感染诊断相依性高[3-4]。目前实验室检测HCV-Ab抗体所包被的基因抗原是由基因工程制备的第三代抗原，主要是衣壳蛋白，NS2，NS3，NS4和NS5等，它的敏感度和特异性都较第二代抗原大幅提高，但是由于厂家基因抗原生产工艺的不同以及包被基因抗原比例不同，导致各实验室检出丙肝抗体的阳性率不完全相同，这样容易导致检出丙肝抗体的漏诊或误诊，因此对在实验室中只查HCV-Ab抗体可能与临床表现不符。采用HCVRNA检查，要求实验室建制严格且成本高，限制了在基础实验室使用。随着第四代基因技术的成熟，HCV-cAg核心抗原的检测也更加广泛的引用于临床。
本文研究显示，在47例HCV-cAg核心抗原阳性标本组中，用HCVRNA检出阳性44例，HCV-cAg检测率与HCVRNA检出率相符为93.6%，这与Akihiko Kato[5]和Keslia[6]等结论相似。因为根据病毒感染规律，其HCV-cAg核心抗原在HCV感染后大约14～70 d就可以在血液中检测到[7]，它在体内产生的时间相较HCVRNA出现约晚1 d[8]，而当HCV-Ab抗体出现后，原来出现的HCV-cAg核心抗原等会被抗体中和消失。但也有一些免疫力缺陷患者从不产生HCV-Ab抗体，导致HCV-Ab抗体可以在患者体内长时间存在。所以HCV-cAg核心抗原检测可以防止早期丙肝感染患者和免疫缺陷感染丙肝的漏诊。, 百拇医药(连丽琴)