不同血清学方法对调查现场包虫病患者血清的检测及评价
摘要：目的 探讨对于调查现场包虫病患者应用不同血清学方法进行血清检测的效用。方法 采用3种囊型包虫抗Dot-ELISA和IHA以及ELISA，1种泡型包虫EM18抗原ELIB检测临床确诊120例包虫病患者的血清。结果 经B超和X线影像学检测确诊的120例包虫病患者，应用不同血清检验方法检查的结果中，囊型包虫病和泡型包虫病各有109例和11例，其中泡型包虫病使用Dot-ELIS、IHA、ELISA该3种血清检验法与B超和X线影像学检测结果等同；肺脏包虫病患者应用囊型包虫抗原IHA检测血清阳性率低于其它部位血清阳性率，但Dot-ELISA检验和IHA检验及ELISA检验所检出的血清阳性率相近。结论 通过甄别不同血清学对包虫病的检测效用，能够为临床治疗和积极预防控制包虫病的流行提供可靠依据，具有较强的实用价值。
关键词：血清学方法；包虫病；预防控制
包虫病多见于新疆、内蒙和青海等农牧区，导致棘球绦及其幼虫寄生人体的原因有农牧民习俗和宗教信仰等原因。随着包虫病感染病例的增多，也使得医疗机构提高了预防控制包虫病流行的力度。而影像检查技术不容易及时发现囊肿或肿块从而导致误诊，本文将探讨通过检测包虫病患者血清的免疫学方法对该病进行检测，以达到预防控制包虫病流行的效用；现报道如下。
, 百拇医药
1资料与方法
1.1抗原与血样 从新宰绵羊肝脏或肺脏提取棘球蚴囊液，用pH 9.6的碳酸盐稀释使其蛋白质含量达到50 μg/ml；采用预包被板和包虫病抗体检测试剂盒等。血样采自流行病学调查现场，经我B超和X线检查确诊的120例包虫病患者的血清各取5 ml，也抽取非包虫病体检者阴性血清作为参照，血清经分离后保存待用。
1.2检验方法 检测方法有：点酶联免疫吸附检验(Dot-ELIS)和微量间接血凝检验法(IHA)，酶联免疫吸附检验(ELISA)和EM18免疫印渍检验(EM18-ELIB)。②Dot-ELIS检验将抗原吸附在PVC反应板表面，待充分反应后用洗涤法彻底清除游离残余。②IHA检验抗原载体经金属阳离子静电作用让蛋白质与红细胞表面结合达到致敏效果，并在微量滴定板上以1：64比例稀释再加入致敏红细胞悬液1滴，混匀1～2 h后观察红细胞凝集程度以确定阳性反应孔为滴度终点。③ELISA检验将棘球蚴囊液抗原稀释至每孔内含蛋白质10 μg/ml，其中IgG抗原酶结合物工作浓度为1：200。显色采用TMBS底物，阳性临界值以x+3s≥阴性为对照。④EM18-ELIB检验抗原采用泡型包虫原头蚴粗抗原，SDS-PAGE电泳结束后再转至NC膜制成抗原膜条，再用所制成的抗原膜条做Western Bolt检验，血清稀释比例为1：100，IgG抗原酶结合物按1：100比例稀释然后经BA底物显色反应后，若8 kDa处出现反应带可判断为阳性。
, 百拇医药
1.3数据处理 采用SPSS17.0软件处理实验数据，计量资料使用(x±s)表示，进行t检验；计数资料使用χ2检验；以P<0.05为差异具有统计学意义。
2结果
2.1不同血清检验方法的检测结果 经B超和X线影像学检测确诊的120例包虫病患者，应用不同血清检验方法检查的结果中，囊型包虫病和泡型包虫病各有109例和11例，其中对泡型包虫病使用Dot-ELIS、IHA、ELISA该3种血清检验法与B超和X线影像学检测结果等同，Dot-ELIS、IHA、ELISA和EM18-ELIB这4中血清检验法也与上述检测方法所得出的结果等同，见表1。
2.2不同血清学方法对包虫病患不同位置的检测结果 肺脏包虫病患者应用囊型包虫抗原IHA检测血清阳性率低于其它部位血清阳性率，但Dot-ELISA检验和IHA检验及ELISA检验所检出的血清阳性率相近，见表2。
, http://www.100md.com
3讨论
包虫病容易寄生于人体组织和器官以至于临床难以依据病原学进行确诊，所以临床对于包虫病的检测通常将查体和影像学以及免疫学等检验结果做综合性判断。影像学检验虽然能够有较高检出率，但影像检查技术不容易及时发现囊肿或肿块从而导致误诊。而包虫病作为地方性疾病，由于感染病例的增多也相应提高临床对其的重视程度。
本次探讨中不同检验方法对囊型和泡型包虫病敏感程度也不尽相同，其中Dot-ELISA抗原和IHA抗原对于该两型包虫病的敏感度相似。对泡型包虫病使用Dot-ELIS、IHA、ELISA该3种血清检验法与B超和X线影像学检测结果等同，但ELISA抗原检出囊型包虫阳性率低于Dot-ELISA和IHA检验法，说明该两种囊型包虫生理和生化代谢各异。因此，需要在临床诊断中加强检测的敏感度。
泡球蚴缺乏完整角质层使得故血清中抗多含有囊型包虫病，B超和影像检验出的钙化的囊型或灶型包虫病多分布于肝、肺2脏，血清学检验方法不易检出的原因，通常为包虫囊肿生长受到抑制后出现退行性改变，减少了血清抗体滴度导致血清学方法难以发现特异性抗体[1]。此外，还需看到本次检测结果中还存在肝脏、肺脏的囊块符合影像征象，但3种血清学检查结果均不支持该结果，这也说明对包虫病的诊断需综合临床和各类检验结果做出判断。
, 百拇医药
本次探讨可见囊型和泡型该2型包虫病的致病性及诊疗方法各异，也导致了临床需审慎做出判断。在钙化的灶型或囊型中若EM18-ELIB检查为阳性则可考虑为泡型包虫病，而单发单囊包虫患者血清呈阳性则说明囊型包虫也会分泌出EM18抗原，同时也说明种棘球绦虫的生理生化代谢因种类不同其差异也不尽相同[2]。据卢爱桃，郭卫东，宋壮志，等报道[3]，目前通过将泡型包虫的原头节进行分离发现其具有EM2、EM2a和EM18特异性抗原，也说明泡型包虫有特异性较强，与本文所探讨的结果具有一致性。
综上，通过采用不同血清学对包虫病进行检测，并对比各种检查方法的检测结果的敏感度和准确率，便于临床分析各种检测方法的效用，有助于临床对包虫病作出准确的诊疗判断，进而可以起到积极预防控制包虫病的流行的作用。
参考文献：
[1]侯岩岩，赵江山.新疆6～12岁学生包虫病血清学调查分析[J].疾病预防控制通报，2014，29(6)：4-5.
[2]高春花，汪俊云，杨玥涛.等.5种抗原检测囊型包虫病血清学评价[J].中国人兽共患病学报，2012，28(8)：811-814.
[3]卢爱桃，郭卫东，宋壮志，等.呼和浩特农村地区人群包虫病血清学调查研究[J].医学动物防制，2013，29(2)：184-185.
编辑/孙杰, http://www.100md.com(买日叶木古丽·吐尔逊)
关键词：血清学方法；包虫病；预防控制
包虫病多见于新疆、内蒙和青海等农牧区，导致棘球绦及其幼虫寄生人体的原因有农牧民习俗和宗教信仰等原因。随着包虫病感染病例的增多，也使得医疗机构提高了预防控制包虫病流行的力度。而影像检查技术不容易及时发现囊肿或肿块从而导致误诊，本文将探讨通过检测包虫病患者血清的免疫学方法对该病进行检测，以达到预防控制包虫病流行的效用；现报道如下。
, 百拇医药
1资料与方法
1.1抗原与血样 从新宰绵羊肝脏或肺脏提取棘球蚴囊液，用pH 9.6的碳酸盐稀释使其蛋白质含量达到50 μg/ml；采用预包被板和包虫病抗体检测试剂盒等。血样采自流行病学调查现场，经我B超和X线检查确诊的120例包虫病患者的血清各取5 ml，也抽取非包虫病体检者阴性血清作为参照，血清经分离后保存待用。
1.2检验方法 检测方法有：点酶联免疫吸附检验(Dot-ELIS)和微量间接血凝检验法(IHA)，酶联免疫吸附检验(ELISA)和EM18免疫印渍检验(EM18-ELIB)。②Dot-ELIS检验将抗原吸附在PVC反应板表面，待充分反应后用洗涤法彻底清除游离残余。②IHA检验抗原载体经金属阳离子静电作用让蛋白质与红细胞表面结合达到致敏效果，并在微量滴定板上以1：64比例稀释再加入致敏红细胞悬液1滴，混匀1～2 h后观察红细胞凝集程度以确定阳性反应孔为滴度终点。③ELISA检验将棘球蚴囊液抗原稀释至每孔内含蛋白质10 μg/ml，其中IgG抗原酶结合物工作浓度为1：200。显色采用TMBS底物，阳性临界值以x+3s≥阴性为对照。④EM18-ELIB检验抗原采用泡型包虫原头蚴粗抗原，SDS-PAGE电泳结束后再转至NC膜制成抗原膜条，再用所制成的抗原膜条做Western Bolt检验，血清稀释比例为1：100，IgG抗原酶结合物按1：100比例稀释然后经BA底物显色反应后，若8 kDa处出现反应带可判断为阳性。
, 百拇医药
1.3数据处理 采用SPSS17.0软件处理实验数据，计量资料使用(x±s)表示，进行t检验；计数资料使用χ2检验；以P<0.05为差异具有统计学意义。
2结果
2.1不同血清检验方法的检测结果 经B超和X线影像学检测确诊的120例包虫病患者，应用不同血清检验方法检查的结果中，囊型包虫病和泡型包虫病各有109例和11例，其中对泡型包虫病使用Dot-ELIS、IHA、ELISA该3种血清检验法与B超和X线影像学检测结果等同，Dot-ELIS、IHA、ELISA和EM18-ELIB这4中血清检验法也与上述检测方法所得出的结果等同，见表1。
2.2不同血清学方法对包虫病患不同位置的检测结果 肺脏包虫病患者应用囊型包虫抗原IHA检测血清阳性率低于其它部位血清阳性率，但Dot-ELISA检验和IHA检验及ELISA检验所检出的血清阳性率相近，见表2。
, http://www.100md.com
3讨论
包虫病容易寄生于人体组织和器官以至于临床难以依据病原学进行确诊，所以临床对于包虫病的检测通常将查体和影像学以及免疫学等检验结果做综合性判断。影像学检验虽然能够有较高检出率，但影像检查技术不容易及时发现囊肿或肿块从而导致误诊。而包虫病作为地方性疾病，由于感染病例的增多也相应提高临床对其的重视程度。
本次探讨中不同检验方法对囊型和泡型包虫病敏感程度也不尽相同，其中Dot-ELISA抗原和IHA抗原对于该两型包虫病的敏感度相似。对泡型包虫病使用Dot-ELIS、IHA、ELISA该3种血清检验法与B超和X线影像学检测结果等同，但ELISA抗原检出囊型包虫阳性率低于Dot-ELISA和IHA检验法，说明该两种囊型包虫生理和生化代谢各异。因此，需要在临床诊断中加强检测的敏感度。
泡球蚴缺乏完整角质层使得故血清中抗多含有囊型包虫病，B超和影像检验出的钙化的囊型或灶型包虫病多分布于肝、肺2脏，血清学检验方法不易检出的原因，通常为包虫囊肿生长受到抑制后出现退行性改变，减少了血清抗体滴度导致血清学方法难以发现特异性抗体[1]。此外，还需看到本次检测结果中还存在肝脏、肺脏的囊块符合影像征象，但3种血清学检查结果均不支持该结果，这也说明对包虫病的诊断需综合临床和各类检验结果做出判断。
, 百拇医药
本次探讨可见囊型和泡型该2型包虫病的致病性及诊疗方法各异，也导致了临床需审慎做出判断。在钙化的灶型或囊型中若EM18-ELIB检查为阳性则可考虑为泡型包虫病，而单发单囊包虫患者血清呈阳性则说明囊型包虫也会分泌出EM18抗原，同时也说明种棘球绦虫的生理生化代谢因种类不同其差异也不尽相同[2]。据卢爱桃，郭卫东，宋壮志，等报道[3]，目前通过将泡型包虫的原头节进行分离发现其具有EM2、EM2a和EM18特异性抗原，也说明泡型包虫有特异性较强，与本文所探讨的结果具有一致性。
综上，通过采用不同血清学对包虫病进行检测，并对比各种检查方法的检测结果的敏感度和准确率，便于临床分析各种检测方法的效用，有助于临床对包虫病作出准确的诊疗判断，进而可以起到积极预防控制包虫病的流行的作用。
参考文献：
[1]侯岩岩，赵江山.新疆6～12岁学生包虫病血清学调查分析[J].疾病预防控制通报，2014，29(6)：4-5.
[2]高春花，汪俊云，杨玥涛.等.5种抗原检测囊型包虫病血清学评价[J].中国人兽共患病学报，2012，28(8)：811-814.
[3]卢爱桃，郭卫东，宋壮志，等.呼和浩特农村地区人群包虫病血清学调查研究[J].医学动物防制，2013，29(2)：184-185.
编辑/孙杰, http://www.100md.com(买日叶木古丽·吐尔逊)