高脂血标本对临床检验项目的干扰及消除
摘要：目的 探究高脂血标本临床检验项目的干扰与消除。方法 选取本院2015年4月～2016年3月收治的40例高脂血症患者空腹静脉血，应用MINDRAY BS-400自动分析仪，2000 r/min离心15 min，得到原高脂血浆。对原高脂血浆、高速离心血浆、乙醚抽取血浆与生理盐水稀释血浆进行检测，测定血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转移酶(GGT)、乳酸脱氢酶(LDH)以及淀粉酶(AMY)。对比3种检测结果。结果 3种检测方法对比差异具有统计学意义(P<0.05)，高速离心血浆各种酶的指标最高，其次为乙醚抽取血浆、生理盐水稀释血浆、原高脂血浆。结果 高脂血标本检测应用高速离心法可减少高脂血标本混浊度，减少对各种酶检测的干扰。
关键词：高脂血标本；临床检验；生化检测
高脂血症(HLM)临床检验工作非常重要，检验准确性会影响治疗效果。在检验技术不断进步下，危重症患者高脂血标本检验项目逐渐增多，但在检验中经常出现血液标本混浊的情况，脂肪乳注射造成的，如不能仔细处理、筛选会使血凝、聚合酶链反应(PCR)以及放射免疫(RIA)的测定结果出现偏差。现就检验干扰与消除报道如下。
, 百拇医药
1 资料与方法
1.1一般资料 选取本院2015年4月～2016年3月收治的40例高脂血症患者空腹静脉血3.0 mL，将收集的血液放置到抗凝管内，检测出三酰甘油11.2～23.4 mmol/L[1]。
1.2方法 对高脂乳凝标本进行2000 r/min离心处理，持续离心15 min，取分离出的高脂血浆，取不同量标本应用不同方法测定。所有标本测定均应用MINDRAY BS-400自动分析仪，均严格按照仪器说明书使用[2]。测定血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转移酶(GGT)、乳酸脱氢酶(LDH)以及淀粉酶(AMY)。第1份血浆应用原高脂血浆测定；高速离心法处理第2份高脂血浆；乙醚振动摇晃离心3000 r/min后提取下层清澈血浆测定，为第3份血浆；第4份高脂血浆应用生理盐水4倍稀释后测定[3]。
1.3统计学处理 本次研究使用SPSS 15.0软件对计数资料进行统计分析，标准差(x±s)，使用 检验计数资料，χ2检测统计结果，以P<0.05表示有统计学意义。
, 百拇医药
2 结果
原高脂血浆、高速离心、乙醚抽取以及生理鹽水稀释三种检测方法对比差异具有统计学意义(P<0.05)，高速离心血浆各种酶的指标最高，其次为乙醚抽取血浆、生理盐水稀释血浆、原高脂血浆，见表1。
3 讨论
高脂血标本定义如下：脂肪代谢或运转异常致使血浆中出现脂质异常，常见血浆中胆固醇(TC)或者三酰甘油水平(TG)较平时升高。当前，我国血清TC标准范围是：正常值：TC<5.20 mmol/L，临界升高：5.22～5.75 mmol/L；升高：TC>5.74 mmol/L。TC性别差异明显，女性TC高于男性，儿童TC<5.40 mmol/L，临界值为4.5～5.2 mmol/L，升高：TC≥5.2 mmol/L。高三酰甘油血症因TC合成障碍或者家族遗传造成，正常值为：儿童TG<1.21 mmol/L，成人TG<1.8 mmol/L，升高：TG>1.8 mmol/L。应用超速离心法可以将血脂蛋白分为不同种类，包括乳糜微粒(CM)、超低密度脂蛋白(VLDL)、中间密度脂蛋白(IDL)以及低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)几种。LDL中有60%的TC，LDL-C含量占50%，由此，LDL脂蛋白含有较多胆固醇，鉴于血浆中60%TC聚集在LDL内，出现高胆固醇血症以后，TC浓度会迅速升高，与LDL水平达到一 致[4]。
, 百拇医药
当前，临床检验中高脂血标本对临床检验项目的干扰是亟待解决的问题，最为有效的解决方法有：改变检测方法以及检测时间。比如，肌酐是代谢最终产物，也是肾功能诊断的重要指标，肾小球滤过能力决定了其在血液中的变化。由此，使用这种方法检测可以有效将快速反应与假性Cr物质消除，减少Cr物质的干扰；此外，可减少多项检测指标对标本的干扰[5]。检测指标需要应用更简单的方法检测，依据试剂不溶于水的特点，在与高脂血清混合后可快速分离浓度高脂质。最后，对凝血相关指标检测使用免疫比浊法，需要按适当比例稀释，才能减少对指标的干扰。即使以上方法能够将高脂血标本干扰消除，但依然不能彻底消除清蛋白、GGT或者血尿素氮等指标干扰。由此，临床检验中需要加强对去脂混合剂的选择与应用，常温下应用高速离心法，可快速分离出可用的标本，进而有效对下层清液进行测定，将胆固醇浓度降低，消除各项检测影响，为高脂血患者提供更为可靠、真实的检验结果。除了应用以上检测方法干扰消除以外，荧光定量检测(PCR)应用的也较多，操作FQ-PCR较容易，更易于在实验室开展，主要检测HBV、DNA，在不同血脂检测中，TG是HVB、DNA、FQ-PCR检测产生的主要干扰，血液中LDL与CM对荧光的屏蔽与吸收作用均是干扰机制。相关试验也证明，如果TG>2.56 mmol/L时，血清HBV、DNA会呈现较低测定值，甚至出现检测假性。在对脂血清标本冷冻以后，高速离心分离出标本TG>55.41 mmol/L时，对检测结果未产生影响，主要原因是TG密度不高，且均在冷冻过后漂浮在最上层，在过滤掉清夜以后，可以将其大量清除，标本经处理以后需多次稀释，进而使干扰减少[6]。高脂血对Hb的检测也会产生一定干扰，可通过离心法将血浆浑浊分离出，然后用生理盐水稀释液替换浑浊血浆检测，可以有效将干扰消除。
, 百拇医药
综上所述，应用简单、可行的方法检测高脂血标本可减少各种干扰，将检验准确性提高，消除不利影响，为临床指标提供更加真实的依据。
参考文献：
[1]成连清.高脂血标本对临床检验项目的干扰及消除对策[J].世界最新医学信息文摘(连续型电子期刊)，2015(83)：125-125，126.
[2]李强，冯丽梅，郑磊，等.稀释法在严重脂血标本凝血检测中的应用[J].血栓与止血学，2011，17(4)：172-174.
[3]郑志友，徐玉兵，杨柳生，等.溶血和脂血标本对凝血指标检测的影响因素探讨[J].临床输血与检验，2013，15(1)：25-28.
[4]蔡丽君，林赟，陈凤平，等.消除血浆高脂血标本对生化项目测定结果干扰的方法研究[J].现代医药卫生，2016，32(12)：1883-1885.
[5]隆维东，黄冬悦，李坚，等.脂质清除剂Lipoclear消除脂血对常规生化项目检测干扰的效果评价[J].国际检验医学杂志，2014，35(1)：72-74.
[6]徐龙强，隋静，于维林，等.高脂血和高白细胞因素对血红蛋白测定的干扰校正分析[J].检验医学，2010，23(5)：488-490.
编辑/翟辰万, 百拇医药(刘娟)
关键词：高脂血标本；临床检验；生化检测
高脂血症(HLM)临床检验工作非常重要，检验准确性会影响治疗效果。在检验技术不断进步下，危重症患者高脂血标本检验项目逐渐增多，但在检验中经常出现血液标本混浊的情况，脂肪乳注射造成的，如不能仔细处理、筛选会使血凝、聚合酶链反应(PCR)以及放射免疫(RIA)的测定结果出现偏差。现就检验干扰与消除报道如下。
, 百拇医药
1 资料与方法
1.1一般资料 选取本院2015年4月～2016年3月收治的40例高脂血症患者空腹静脉血3.0 mL，将收集的血液放置到抗凝管内，检测出三酰甘油11.2～23.4 mmol/L[1]。
1.2方法 对高脂乳凝标本进行2000 r/min离心处理，持续离心15 min，取分离出的高脂血浆，取不同量标本应用不同方法测定。所有标本测定均应用MINDRAY BS-400自动分析仪，均严格按照仪器说明书使用[2]。测定血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转移酶(GGT)、乳酸脱氢酶(LDH)以及淀粉酶(AMY)。第1份血浆应用原高脂血浆测定；高速离心法处理第2份高脂血浆；乙醚振动摇晃离心3000 r/min后提取下层清澈血浆测定，为第3份血浆；第4份高脂血浆应用生理盐水4倍稀释后测定[3]。
1.3统计学处理 本次研究使用SPSS 15.0软件对计数资料进行统计分析，标准差(x±s)，使用 检验计数资料，χ2检测统计结果，以P<0.05表示有统计学意义。
, 百拇医药
2 结果
原高脂血浆、高速离心、乙醚抽取以及生理鹽水稀释三种检测方法对比差异具有统计学意义(P<0.05)，高速离心血浆各种酶的指标最高，其次为乙醚抽取血浆、生理盐水稀释血浆、原高脂血浆，见表1。
3 讨论
高脂血标本定义如下：脂肪代谢或运转异常致使血浆中出现脂质异常，常见血浆中胆固醇(TC)或者三酰甘油水平(TG)较平时升高。当前，我国血清TC标准范围是：正常值：TC<5.20 mmol/L，临界升高：5.22～5.75 mmol/L；升高：TC>5.74 mmol/L。TC性别差异明显，女性TC高于男性，儿童TC<5.40 mmol/L，临界值为4.5～5.2 mmol/L，升高：TC≥5.2 mmol/L。高三酰甘油血症因TC合成障碍或者家族遗传造成，正常值为：儿童TG<1.21 mmol/L，成人TG<1.8 mmol/L，升高：TG>1.8 mmol/L。应用超速离心法可以将血脂蛋白分为不同种类，包括乳糜微粒(CM)、超低密度脂蛋白(VLDL)、中间密度脂蛋白(IDL)以及低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)几种。LDL中有60%的TC，LDL-C含量占50%，由此，LDL脂蛋白含有较多胆固醇，鉴于血浆中60%TC聚集在LDL内，出现高胆固醇血症以后，TC浓度会迅速升高，与LDL水平达到一 致[4]。
, 百拇医药
当前，临床检验中高脂血标本对临床检验项目的干扰是亟待解决的问题，最为有效的解决方法有：改变检测方法以及检测时间。比如，肌酐是代谢最终产物，也是肾功能诊断的重要指标，肾小球滤过能力决定了其在血液中的变化。由此，使用这种方法检测可以有效将快速反应与假性Cr物质消除，减少Cr物质的干扰；此外，可减少多项检测指标对标本的干扰[5]。检测指标需要应用更简单的方法检测，依据试剂不溶于水的特点，在与高脂血清混合后可快速分离浓度高脂质。最后，对凝血相关指标检测使用免疫比浊法，需要按适当比例稀释，才能减少对指标的干扰。即使以上方法能够将高脂血标本干扰消除，但依然不能彻底消除清蛋白、GGT或者血尿素氮等指标干扰。由此，临床检验中需要加强对去脂混合剂的选择与应用，常温下应用高速离心法，可快速分离出可用的标本，进而有效对下层清液进行测定，将胆固醇浓度降低，消除各项检测影响，为高脂血患者提供更为可靠、真实的检验结果。除了应用以上检测方法干扰消除以外，荧光定量检测(PCR)应用的也较多，操作FQ-PCR较容易，更易于在实验室开展，主要检测HBV、DNA，在不同血脂检测中，TG是HVB、DNA、FQ-PCR检测产生的主要干扰，血液中LDL与CM对荧光的屏蔽与吸收作用均是干扰机制。相关试验也证明，如果TG>2.56 mmol/L时，血清HBV、DNA会呈现较低测定值，甚至出现检测假性。在对脂血清标本冷冻以后，高速离心分离出标本TG>55.41 mmol/L时，对检测结果未产生影响，主要原因是TG密度不高，且均在冷冻过后漂浮在最上层，在过滤掉清夜以后，可以将其大量清除，标本经处理以后需多次稀释，进而使干扰减少[6]。高脂血对Hb的检测也会产生一定干扰，可通过离心法将血浆浑浊分离出，然后用生理盐水稀释液替换浑浊血浆检测，可以有效将干扰消除。
, 百拇医药
综上所述，应用简单、可行的方法检测高脂血标本可减少各种干扰，将检验准确性提高，消除不利影响，为临床指标提供更加真实的依据。
参考文献：
[1]成连清.高脂血标本对临床检验项目的干扰及消除对策[J].世界最新医学信息文摘(连续型电子期刊)，2015(83)：125-125，126.
[2]李强，冯丽梅，郑磊，等.稀释法在严重脂血标本凝血检测中的应用[J].血栓与止血学，2011，17(4)：172-174.
[3]郑志友，徐玉兵，杨柳生，等.溶血和脂血标本对凝血指标检测的影响因素探讨[J].临床输血与检验，2013，15(1)：25-28.
[4]蔡丽君，林赟，陈凤平，等.消除血浆高脂血标本对生化项目测定结果干扰的方法研究[J].现代医药卫生，2016，32(12)：1883-1885.
[5]隆维东，黄冬悦，李坚，等.脂质清除剂Lipoclear消除脂血对常规生化项目检测干扰的效果评价[J].国际检验医学杂志，2014，35(1)：72-74.
[6]徐龙强，隋静，于维林，等.高脂血和高白细胞因素对血红蛋白测定的干扰校正分析[J].检验医学，2010，23(5)：488-490.
编辑/翟辰万, 百拇医药(刘娟)