1 资料与方法

    1.1材料

    1.1.1实验动物 6 w龄雌性昆明系小白鼠(体重25～30 g)，10w龄以上成熟雄性昆明系小白鼠(体重30～35 g)，购自浙江中医药大学实验动物中心(动物合格证号：SYXK(浙)2013-0184)。

    1.1.2药物与试剂 尿促性腺激素(HMG)与绒毛膜促性腺激素(HCG)均购自丽珠制药厂，透明质酸酶(hyaluronidas)及配子处理液G-GAMETE 和G-IVF购自Vitrolife 公司，卵子玻璃化冻融试剂盒购自Origio公司，石蜡油购自SAGE 公司。

    1.1.3耗材与设备 四孔皿购自NUNC公司，60 mm 培养皿及巴斯德管购自FALCON 公司， 装载工具CRYOTOP购自KITAZATO公司。激光破膜仪为德国CTAX，超净工作台为丹麦IVFTECH，解剖显微镜为日本OLYMPUS，培养箱为美国THEMRO，液氮罐为美国MVE。

    1.2方法

    1.2.1冻融前小鼠卵母细胞的准备 雌鼠腹腔注射10 IU的HMG ......