激光透明带穿孔和激光透明带削薄对冻融小鼠卵子受精率的影响(3)
孙玲等[8]使用激光透明带穿孔和激光透明带削薄技术对受精后第3 d的胚胎进行辅助孵化操作，发现穿孔组的妊娠率45.8%(44/96)和着床率25.2%(68/270)均要高于削薄组的40.7%(37/91)和24.8%(58/234)，这似乎也提示激光穿孔的效果要优于激光削薄。但黄绮云[9]通过对冻融胚胎进行激光透明带穿孔和激光透明带薄化却得出了截然相反的结果，在其实验中，穿孔组的种植率及妊娠率均要低于薄化组。他认为当用激光将整个透明带穿透，热效应对卵裂球产生了极大伤害，而激光削薄处理与之相比则可以最大程度上避免这一损伤，获得更好的胚胎孵出结局。但是在激光辅助孵化中，透明带的削薄只是克服了孵化前的简单机械性阻力，减低孵化过程中所消耗的能量阈值，而精卵结合的受精过程却是一个非常复杂的生物分子化学反应过程，要克服的不只是物理上的阻力[10]。
刘丽均等[7]通过免疫荧光染色技术发现小鼠卵子冻融后透明带糖蛋白-2结构受到不同程度的损伤，而糖蛋白-2上存在着精卵结合的作用位点，它的受损使得精子无法结合到透明带上，也无法诱发其后的顶体反应，而顶体反应是精子穿过透明带的先决条件[10]。因此，激光透明带削薄处理虽然克服了部分透明带冻融变硬造成的机械阻力，但其不能修复冻融对糖蛋白造成的损伤，激光处理甚至进一步破坏了糖蛋白结构，最终使得精子无法识别透明带上的结合位点，而一旦精子不能与透明带结合，精子也就不能穿过最后一层透明带[10]。这也解释了本研究中用激光削薄处理透明带并未取得理想结果的原因。
, 百拇医药
综上所述，在应对卵子因冻融导致的受精困难的问题时，不建议采用激光透明带削薄的方法，而应控制好激光激发的强度和位置，完全将透明带某一区域穿透，如此才能有效提高冻融卵子受精率。
参考文献：
[1]Valojerdi MR，Eftekhari - Yazdi P，Karimian L，et al. Effect of laser zona pellucida opening on clinical outcome of assisted reproduction technology in patients with advanced female age，recurrent implantation failure， or frozen - thawed embryos[J]. Fertil Steril，2008，90： 84 - 91.
[2]Check JH，Hoover L，Nazari A，et al. The effect of assisted hatching on pregnancy rates after frozen embryo transfer[J].Fertil Steril，1996，65： 254 - 257.
, 百拇医药
[3]劉吉，程东凯. 激光辅助孵化对冻融胚胎种植潜力的影响[J]. 中外医疗，2012，10：23-25.
[4]Wininger J D， Kort H I. Cryopreservation of immature and mature human oocytes[J].Seminars Reprod Medi，2002，20： 45- 49.
[5]Yang l，Fang Y. N. Wen J. D. et al. The type and extent of injuries in vitrified mouse oocytes[J].Cryobiology，2012，64： 97 - 102.
[6]Ko CS，Ding DC，Chu TW，et al. Changes to the meiotic spindle and zona pellucida of mature mouse oocytes following different cryopreservation methods[J].Anim Reprod Sci. 2008 May； 105( 3 - 4) ： 272 - 282.
, 百拇医药
[7]刘丽均，郁丽丽，王俊风，等. 激光打孔技术在小鼠卵子冷冻保存上的运用[J].中国比较医学杂志，2013，1：31-36.
[8]孙玲，陈士岭，李劲，等. 两种不同激光辅助孵化方法对体外受精一胚胎移植妊娠结局的影响[J]. 广东医学，2007，28(5)：733-735.
[9]黄绮云. 激光透明带打孔和激光透明带薄化辅助孵化方法在冻融胚胎移植中的应用[J].中国医药导报，2015，8：78-81.
[10]黄国宁，孙海翔.体外受精-胚胎移植实验室技术[M].北京： 人民卫生出版社，2012：110-112，301-310.
编辑/金昊天, 百拇医药(饶金鹏 邱枫 钱小红 蔡益婷)
刘丽均等[7]通过免疫荧光染色技术发现小鼠卵子冻融后透明带糖蛋白-2结构受到不同程度的损伤，而糖蛋白-2上存在着精卵结合的作用位点，它的受损使得精子无法结合到透明带上，也无法诱发其后的顶体反应，而顶体反应是精子穿过透明带的先决条件[10]。因此，激光透明带削薄处理虽然克服了部分透明带冻融变硬造成的机械阻力，但其不能修复冻融对糖蛋白造成的损伤，激光处理甚至进一步破坏了糖蛋白结构，最终使得精子无法识别透明带上的结合位点，而一旦精子不能与透明带结合，精子也就不能穿过最后一层透明带[10]。这也解释了本研究中用激光削薄处理透明带并未取得理想结果的原因。
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综上所述，在应对卵子因冻融导致的受精困难的问题时，不建议采用激光透明带削薄的方法，而应控制好激光激发的强度和位置，完全将透明带某一区域穿透，如此才能有效提高冻融卵子受精率。
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