调节性T细胞在肝细胞癌患者中的表达频率及意义(2)
1.4流式细胞检测CD4+CD25high Treg细胞比例 取肝细胞癌患者和健康对照者EDTA抗凝静脉血50 μL于流式检测管底，加入CD4和CD25抗体各20 μL室温避光孵育20 min，加800 μL红细胞裂解液混匀，室温避光15 min，离心去上清；用PBS 洗2次去上清，加500 μL PBS重悬上机，根据CD45和SSC圈定淋巴细胞群，再对CD4+ T淋巴细胞进行设门，圈定CD4+CD25high Treg细胞群，同时设置同型对照，数据收集及分析采用 CXP Cytometer处理。
1.4统计学处理 以SPSS 19.0统计学软件分析数据，所有实验数据均以平均值±标准差(x±s)形式表示，组间Treg細胞平均水平比较采用t检验，以P<0.05视为差异有统计学意义。
2 结果
2.1肝细胞癌患者外周血Treg细胞比例 分析肝细胞癌和健康对照者外周CD4+CD25high Treg细胞比例，结果发现肝细胞癌患者Treg细胞比例显著高于健康对照组[(4.91±2.37)% vs (1.62±0.73)%，P<0.05]，差异有统计学意义。
, 百拇医药
2.2肝细胞癌患者外周血Treg细胞比例与临床分期间的关系
进一步分析发现Treg细胞随肝细胞癌进展比例不断增加，III期患者显著高于I和II期患者，且均高于健康对照组，组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。
3 讨论
免疫平衡紊乱与肿瘤的发生发展间存在密切关联，肿瘤发生是肿瘤细胞免疫逃逸的结果，而免疫效应细胞在此过程扮演重要角色，近年来大量研究证实Treg与肿瘤免疫监视及促进肿瘤发生进展密切相关。CD4+CD25high Treg细胞是维持免疫耐受的重要因素之一，其主要功能即限制T细胞的活化，调控免疫反应，进而保护机体避免自身免疫性疾病发生。目前已经证实Treg细胞介导的免疫逃逸是肿瘤免疫中至关重要环节，其也是抗肿瘤治疗失败的主要原因之一。Treg细胞可促进肿瘤细胞逃避免疫监视进而导致肿瘤侵袭转移[6]。
, 百拇医药 本研究通过对肝细胞癌患者及健康对照体内Treg细胞比例测定发现癌症患者外周CD4+CD25high Treg细胞比例显著高于健康对照组，差异有统计学意义。进一步分析发现该细胞比例与临床分期相关，随着肝细胞癌临床进展不断增加。
以上研究结果提示肝细胞癌患者CD4+CD25high Treg细胞比率明显高于健康组，说明肝细胞癌患者Treg升高，机体细胞免疫功能受到抑制，可能与CD4+CD25high Treg细胞的免疫抑制作用导致肝细胞癌患者抗肿瘤免疫应答受到抑制有关，使机体无法对现有肿瘤细胞进行有效清除。
参考文献：
[1]Llovet J M，Bruix J.Llovet JM，Bruix J.Novel advancements in the management of hepatocellular carcinoma in 2008.J Hepatol 48 (Suppl 1)：S20-S37[J].2008，48 Suppl 1(Suppl 1).
, 百拇医药
[2]Curiel T J，Coukos G，Zou L，et al.Specific recruitment of regulatory T cells in ovarian carcinoma fosters immune privilege and predicts reduced survival[J].Nature medicine，2004，10(9)：942-949.
[3]Roychoudhuri R，Eil R L，Restifo N P.The interplay of effector and regulatory T cells in cancer[J].Current Opinion in Immunology，2015， 33：101.
[4]Liang X S，Li C Z，Ying Z，et al.Changes of Treg and Th17 cells balance in the development of acute and chronic hepatitis B virus infection[J].BMC Gastroenterology，2012，12(1)：43.
, 百拇医药
[5] Sheng J M，Zhao W H，Wu F S，et al.The Chinese classification system compared with TNM staging in prognosis of patients with primary hepatic carcinoma after resection[J].国际肝胆胰杂志(英文)，2005，4(4)：561.
[6]Wolf D，Sopper S，Pircher A，et al.Treg(s) in Cancer： Friends or Foe？[J].Journal of Cellular Physiology，2015，230(11)：2598-2605.
编辑/罗茗柯, 百拇医药(许海波)
1.4统计学处理 以SPSS 19.0统计学软件分析数据，所有实验数据均以平均值±标准差(x±s)形式表示，组间Treg細胞平均水平比较采用t检验，以P<0.05视为差异有统计学意义。
2 结果
2.1肝细胞癌患者外周血Treg细胞比例 分析肝细胞癌和健康对照者外周CD4+CD25high Treg细胞比例，结果发现肝细胞癌患者Treg细胞比例显著高于健康对照组[(4.91±2.37)% vs (1.62±0.73)%，P<0.05]，差异有统计学意义。
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2.2肝细胞癌患者外周血Treg细胞比例与临床分期间的关系
进一步分析发现Treg细胞随肝细胞癌进展比例不断增加，III期患者显著高于I和II期患者，且均高于健康对照组，组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。
3 讨论
免疫平衡紊乱与肿瘤的发生发展间存在密切关联，肿瘤发生是肿瘤细胞免疫逃逸的结果，而免疫效应细胞在此过程扮演重要角色，近年来大量研究证实Treg与肿瘤免疫监视及促进肿瘤发生进展密切相关。CD4+CD25high Treg细胞是维持免疫耐受的重要因素之一，其主要功能即限制T细胞的活化，调控免疫反应，进而保护机体避免自身免疫性疾病发生。目前已经证实Treg细胞介导的免疫逃逸是肿瘤免疫中至关重要环节，其也是抗肿瘤治疗失败的主要原因之一。Treg细胞可促进肿瘤细胞逃避免疫监视进而导致肿瘤侵袭转移[6]。
, 百拇医药 本研究通过对肝细胞癌患者及健康对照体内Treg细胞比例测定发现癌症患者外周CD4+CD25high Treg细胞比例显著高于健康对照组，差异有统计学意义。进一步分析发现该细胞比例与临床分期相关，随着肝细胞癌临床进展不断增加。
以上研究结果提示肝细胞癌患者CD4+CD25high Treg细胞比率明显高于健康组，说明肝细胞癌患者Treg升高，机体细胞免疫功能受到抑制，可能与CD4+CD25high Treg细胞的免疫抑制作用导致肝细胞癌患者抗肿瘤免疫应答受到抑制有关，使机体无法对现有肿瘤细胞进行有效清除。
参考文献：
[1]Llovet J M，Bruix J.Llovet JM，Bruix J.Novel advancements in the management of hepatocellular carcinoma in 2008.J Hepatol 48 (Suppl 1)：S20-S37[J].2008，48 Suppl 1(Suppl 1).
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[2]Curiel T J，Coukos G，Zou L，et al.Specific recruitment of regulatory T cells in ovarian carcinoma fosters immune privilege and predicts reduced survival[J].Nature medicine，2004，10(9)：942-949.
[3]Roychoudhuri R，Eil R L，Restifo N P.The interplay of effector and regulatory T cells in cancer[J].Current Opinion in Immunology，2015， 33：101.
[4]Liang X S，Li C Z，Ying Z，et al.Changes of Treg and Th17 cells balance in the development of acute and chronic hepatitis B virus infection[J].BMC Gastroenterology，2012，12(1)：43.
, 百拇医药
[5] Sheng J M，Zhao W H，Wu F S，et al.The Chinese classification system compared with TNM staging in prognosis of patients with primary hepatic carcinoma after resection[J].国际肝胆胰杂志(英文)，2005，4(4)：561.
[6]Wolf D，Sopper S，Pircher A，et al.Treg(s) in Cancer： Friends or Foe？[J].Journal of Cellular Physiology，2015，230(11)：2598-2605.
编辑/罗茗柯, 百拇医药(许海波)
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