CD164对胶质瘤细胞生长的影响研究(3)
2.3 CD164对体外胶质瘤细胞中PTEN表达的影响
为研究CD164影响胶质瘤细胞增殖的作用机制，本研究检测了下调CD164后对U251细胞中PTEN蛋白的影响。western blot结果表明，与阴性对照组相比较，U251细胞经感染shRNA CD164后可显著上调U251细胞中PTEN蛋白的表达，而shRNA NC对U251细胞中PTEN的表达无明显影响(图2)。
3讨论
本研究中，我们首先检测了45例胶质瘤组织和正常脑组织中CD164的表达情况，结果显示，CD164在胶质瘤组织中的表达水平明显高于正常脑组织，提示CD164在胶质瘤发生的早期阶段可能充当着癌基因的作用，同时CD164在体外胶质瘤细胞株中的表达也高于正常胶质细胞中的表达，这种CD164在良恶性组织及细胞中的表达差异表明CD164与胶质瘤细胞的发生和发展可能存在一定的关联。为进一步研究其在胶质瘤恶性生物学行为中的作用，本研究通过RNA干扰技术沉默CD164在体外胶质瘤细胞中的表达，经流式细胞术证实成功構建稳定沉默CD164表达的U251细胞株，同时CCK-8实验结果表明沉默CD164后可抑制体外胶质瘤细胞增殖，表明CD164在调控胶质瘤细胞增殖中发挥了一定作用。
, 百拇医药
PTEN作为一个位于染色体10q23.3上的基因，也是在人类肿瘤中继p53基因之后发现的最易发生变异的基因。PTEN基因在人体正常组织细胞中呈高表达，其正常表达参与了蛋白质和酯类底物酪氨酸、丝/苏氨酸磷酸化的调节过程，在细胞周期调节、增殖、凋亡和侵袭等生理活动中发挥广泛的调控作用[7-8]。而PTEN基因突变或缺失及蛋白表达异常可促进细胞增生并抑制细胞凋亡，PTEN在恶性肿瘤中的表达与肿瘤TNM分期呈负相关，同时PTEN的低表达与乳腺癌化疗耐药密切相关[9-11]。同时PTEN的缺失或低表达可抑制PI3K激酶活性，使PIP3去磷酸化，引起PIP3催化亚基的表达放大而导致AKT磷酸化，从而在恶性肿瘤细胞增殖、凋亡、蛋白合成和转移等多种生理活动中发挥重要作用，这是PTEN调节肿瘤细胞增殖和凋亡的重要作用机制，既往研究表明，抑制PTEN/PI3K/AKT 通路的激活可有效抑制恶性肿瘤细胞增殖和转移[12]。在本研究中，笔者观察到沉默CD164在体外胶质瘤细胞中的表达后可诱导PTEN在细胞中的表达，因此笔者猜想CD164可能通过调控PTEN的表达从而影响体外胶质瘤细胞增殖。
, 百拇医药
综上所述，本研究表明CD164可负向调控PTEN的表达从而影响体外胶质瘤细胞增殖，但CD164是否对体内胶质瘤同样具有调节增殖能力尚未可知，同时虽然证实CD164与PTEN在体外胶质瘤细胞中存在一定联系，但CD164与PTEN之间是直接调控还是间接调控仍需进一步实验明确。但本次研究为临床胶质瘤基因治疗提供一个新的作用靶点，在揭示胶质瘤的发病机制及治疗上具有一定积极意义。
参考文献：
[1]Jiang CM，Wang XH，Shu J，et al.Analysis of differentially expressed genes based on microarray data of glioma [J].Int J Clin Exp Med，2015，8(10)：17321-17332.
[2]Hu J，Sun T，Wang H，et al.MiR-215 Is Induced Post-transcriptionally via HIF-Drosha Complex and Mediates Glioma-Initiating Cell Adaptation to Hypoxia by Targeting KDM1B [J].Cancer Cell，2016，29(1)：49-60.
, 百拇医药
[3]Forde S，Tye BJ，Newey SE，et al.Endolyn(CD164)modulates the CXCL12-mediated migration of umbilical cord blood CD133+ cells [J].Blood，2007，109(5)：1825-1833.
[4]Shi JA，Lu DL，Huang X，et al.miR-219 inhibits the proliferation，migration and invasion of medulloblastoma cells by targeting CD164 [J].Int J Mol Med，2014，34(1)：237-243.
[5]Tang J，Zhang L，She X，et al.Inhibiting CD164 expression in colon cancer cell line HCT116 leads to reduced cancer cell proliferation，mobility，and metastasis in vitro and in vivo [J]. Cancer Invest，2012，30(5)：380-389.
[6]Coustan-Smith E，Song G，Clark C，et al.New markers for minimal residual disease detection in acute lymphoblastic leukemia [J].Blood，2011，117(23)：6267-676.
[7]Siddiqui S，Akhter N，Deo SV，et al.A study on promoter methylation of PTEN in sporadic breast cancer patients from North India [J].Breast Cancer，2016，23(6)：922-931., 百拇医药(李志峰 陈勇 童仲驰)
为研究CD164影响胶质瘤细胞增殖的作用机制，本研究检测了下调CD164后对U251细胞中PTEN蛋白的影响。western blot结果表明，与阴性对照组相比较，U251细胞经感染shRNA CD164后可显著上调U251细胞中PTEN蛋白的表达，而shRNA NC对U251细胞中PTEN的表达无明显影响(图2)。
3讨论
本研究中，我们首先检测了45例胶质瘤组织和正常脑组织中CD164的表达情况，结果显示，CD164在胶质瘤组织中的表达水平明显高于正常脑组织，提示CD164在胶质瘤发生的早期阶段可能充当着癌基因的作用，同时CD164在体外胶质瘤细胞株中的表达也高于正常胶质细胞中的表达，这种CD164在良恶性组织及细胞中的表达差异表明CD164与胶质瘤细胞的发生和发展可能存在一定的关联。为进一步研究其在胶质瘤恶性生物学行为中的作用，本研究通过RNA干扰技术沉默CD164在体外胶质瘤细胞中的表达，经流式细胞术证实成功構建稳定沉默CD164表达的U251细胞株，同时CCK-8实验结果表明沉默CD164后可抑制体外胶质瘤细胞增殖，表明CD164在调控胶质瘤细胞增殖中发挥了一定作用。
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PTEN作为一个位于染色体10q23.3上的基因，也是在人类肿瘤中继p53基因之后发现的最易发生变异的基因。PTEN基因在人体正常组织细胞中呈高表达，其正常表达参与了蛋白质和酯类底物酪氨酸、丝/苏氨酸磷酸化的调节过程，在细胞周期调节、增殖、凋亡和侵袭等生理活动中发挥广泛的调控作用[7-8]。而PTEN基因突变或缺失及蛋白表达异常可促进细胞增生并抑制细胞凋亡，PTEN在恶性肿瘤中的表达与肿瘤TNM分期呈负相关，同时PTEN的低表达与乳腺癌化疗耐药密切相关[9-11]。同时PTEN的缺失或低表达可抑制PI3K激酶活性，使PIP3去磷酸化，引起PIP3催化亚基的表达放大而导致AKT磷酸化，从而在恶性肿瘤细胞增殖、凋亡、蛋白合成和转移等多种生理活动中发挥重要作用，这是PTEN调节肿瘤细胞增殖和凋亡的重要作用机制，既往研究表明，抑制PTEN/PI3K/AKT 通路的激活可有效抑制恶性肿瘤细胞增殖和转移[12]。在本研究中，笔者观察到沉默CD164在体外胶质瘤细胞中的表达后可诱导PTEN在细胞中的表达，因此笔者猜想CD164可能通过调控PTEN的表达从而影响体外胶质瘤细胞增殖。
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综上所述，本研究表明CD164可负向调控PTEN的表达从而影响体外胶质瘤细胞增殖，但CD164是否对体内胶质瘤同样具有调节增殖能力尚未可知，同时虽然证实CD164与PTEN在体外胶质瘤细胞中存在一定联系，但CD164与PTEN之间是直接调控还是间接调控仍需进一步实验明确。但本次研究为临床胶质瘤基因治疗提供一个新的作用靶点，在揭示胶质瘤的发病机制及治疗上具有一定积极意义。
参考文献：
[1]Jiang CM，Wang XH，Shu J，et al.Analysis of differentially expressed genes based on microarray data of glioma [J].Int J Clin Exp Med，2015，8(10)：17321-17332.
[2]Hu J，Sun T，Wang H，et al.MiR-215 Is Induced Post-transcriptionally via HIF-Drosha Complex and Mediates Glioma-Initiating Cell Adaptation to Hypoxia by Targeting KDM1B [J].Cancer Cell，2016，29(1)：49-60.
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[3]Forde S，Tye BJ，Newey SE，et al.Endolyn(CD164)modulates the CXCL12-mediated migration of umbilical cord blood CD133+ cells [J].Blood，2007，109(5)：1825-1833.
[4]Shi JA，Lu DL，Huang X，et al.miR-219 inhibits the proliferation，migration and invasion of medulloblastoma cells by targeting CD164 [J].Int J Mol Med，2014，34(1)：237-243.
[5]Tang J，Zhang L，She X，et al.Inhibiting CD164 expression in colon cancer cell line HCT116 leads to reduced cancer cell proliferation，mobility，and metastasis in vitro and in vivo [J]. Cancer Invest，2012，30(5)：380-389.
[6]Coustan-Smith E，Song G，Clark C，et al.New markers for minimal residual disease detection in acute lymphoblastic leukemia [J].Blood，2011，117(23)：6267-676.
[7]Siddiqui S，Akhter N，Deo SV，et al.A study on promoter methylation of PTEN in sporadic breast cancer patients from North India [J].Breast Cancer，2016，23(6)：922-931., 百拇医药(李志峰 陈勇 童仲驰)