CD164对胶质瘤细胞生长的影响研究(1)
摘要：目的 研究CD164在胶质瘤组织及细胞系中的表达，以及对体外胶质瘤细胞增殖的作用。方法 采用qRT-PCR分析CD164在45例胶质瘤组织和正常脑组织中的表达，利用western blot检测CD164在人胶质瘤细胞株SF295、SHG-44、U87和U251以及人正常星形胶质细胞系NHA中的表达；构建沉默CD164的慢病毒载体，并将其感染至胶质瘤细胞株U251，CCK-8法检测细胞增殖；western blot法检测感染CD164 shRNA后对U251细胞中PTEN蛋白表达的影响。结果 CD164在胶质瘤组织的表达较正常脑组织显著上调，差异有统计学(P<0.001)；与NHA细胞相比较，CD164在人胶质瘤细胞系SF295、SHG-44、U87和U251细胞中的表达量明显增加，具有明显的统计学差异性(P<0.001)；U251细胞感染CD164 shRNA后，细胞存活率较阴性对照组下降，两组结果存在明显的统计学差异(P<0.001)；感染CD164 shRNA至U251细胞后PTEN蛋白表达水平明显升高。结论 CD164可能通过调控PTEN的表达从而影响胶质瘤细胞增殖。
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关键词：胶质瘤；CD164；PTEN；增殖
中图分类号：R739.41 文献标识码：A 文章编号：1006-1959(2017)22-0029-04
Abstract：Objective To investigate the expression of CD164 in glioma tissues and cell lines，and the effects on glioma cell proliferation in vitro. Methods The expression of qRT-PCR of CD164 in 45 cases of glioma tissues and normal brain tissues，using western blot to detect CD164 in the human glioma cell lines SF295，SHG-44，U87 and U251 and the expression of the normal astrocyte cell line NHA；lentiviral vector construction of CD164 silencing，and the infection to U251 glioma cell line，cell proliferation was detected by CCK-8；CD164 shRNA western blot infection detection method of U251 cells PTEN protein expression.Results The expression of CD164 in glioma compared with normal brain tissue the organization was significantly increased，the difference was statistically(P<0.001)；compared with NHA cells，CD164 in human glioma cell lines SF295，SHG-44， expression of U87 and U251 cells increased significantly，a statistically significant difference(P<0.001)；U251 cells infected with CD164 shRNA，the cell survival rate decreased compared with negative control group，there were statistically significant differences between the results of the two groups(P<0.001)；the expression level of PTEN protein was significantly increased CD164 shRNA infection to U251 cells.Conclusion CD164 may affect the proliferation of glioma cells by expression the regulation of PTEN.
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Key words：Glioma；CD164；PTEN；Proliferation
胶质瘤也被成为胶质细胞瘤，是最常见的神经系统恶性肿瘤，其发病率占所有颅内肿瘤的30%～40%，2015年美国大约有20000胶质瘤新发病例，同时胶质瘤在青少年人群中的发病率呈逐年上升的态势[1]。近年来，随着对胶质瘤基因分析研究的不断深入，针对胶质瘤的诸如免疫治疗和基因治疗等多种新型治疗方式不断涌现，有望更进一步改善胶质瘤患者预后[2]。CD164作为一种定位于6号染色体的唾液酸黏蛋白[3]。研究表明CD164在机体造血和调节正常细胞生长分化过程中发挥一定调控作用；同时CD164在调节恶性肿瘤细胞生长、凋亡和侵袭性行为中也发挥了一定作用；CD164已经被证实在结肠癌、宫颈癌和成神经管细胞瘤等实体肿瘤发生和发展过程中发挥着重要作用[4-5]；最新研究结果表明CD164可作为急性成淋巴细胞性白血病中分子生物学标记[6]。目前CD164与人脑胶质瘤的相关性研究尚未见报道，为此，本研究拟探讨CD164对人脑胶质瘤细胞生长的作用，并探讨其可能作用机制。
1材料与方法
1.1组织标本
收集岳阳市第二人民医院神经外科在2012年6月～2014年6月收治的45例脑胶质瘤患者的临床标本，男22例，女23例，年龄48.9～71.2岁，平均年龄(58.6±6.4)岁，另外设立5例脑损伤患者正常脑组织标本作为对照。所有纳入本次队列的患者均经过2位经验丰富的病理科专家分别确诊为胶质瘤，且所有患者均未接受新辅助治疗。其他排除标准包括下咽困難、急慢性感染、充血性心力衰竭、COPD和肝硬化。, http://www.100md.com(李志峰 陈勇 童仲驰)
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关键词：胶质瘤；CD164；PTEN；增殖
中图分类号：R739.41 文献标识码：A 文章编号：1006-1959(2017)22-0029-04
Abstract：Objective To investigate the expression of CD164 in glioma tissues and cell lines，and the effects on glioma cell proliferation in vitro. Methods The expression of qRT-PCR of CD164 in 45 cases of glioma tissues and normal brain tissues，using western blot to detect CD164 in the human glioma cell lines SF295，SHG-44，U87 and U251 and the expression of the normal astrocyte cell line NHA；lentiviral vector construction of CD164 silencing，and the infection to U251 glioma cell line，cell proliferation was detected by CCK-8；CD164 shRNA western blot infection detection method of U251 cells PTEN protein expression.Results The expression of CD164 in glioma compared with normal brain tissue the organization was significantly increased，the difference was statistically(P<0.001)；compared with NHA cells，CD164 in human glioma cell lines SF295，SHG-44， expression of U87 and U251 cells increased significantly，a statistically significant difference(P<0.001)；U251 cells infected with CD164 shRNA，the cell survival rate decreased compared with negative control group，there were statistically significant differences between the results of the two groups(P<0.001)；the expression level of PTEN protein was significantly increased CD164 shRNA infection to U251 cells.Conclusion CD164 may affect the proliferation of glioma cells by expression the regulation of PTEN.
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Key words：Glioma；CD164；PTEN；Proliferation
胶质瘤也被成为胶质细胞瘤，是最常见的神经系统恶性肿瘤，其发病率占所有颅内肿瘤的30%～40%，2015年美国大约有20000胶质瘤新发病例，同时胶质瘤在青少年人群中的发病率呈逐年上升的态势[1]。近年来，随着对胶质瘤基因分析研究的不断深入，针对胶质瘤的诸如免疫治疗和基因治疗等多种新型治疗方式不断涌现，有望更进一步改善胶质瘤患者预后[2]。CD164作为一种定位于6号染色体的唾液酸黏蛋白[3]。研究表明CD164在机体造血和调节正常细胞生长分化过程中发挥一定调控作用；同时CD164在调节恶性肿瘤细胞生长、凋亡和侵袭性行为中也发挥了一定作用；CD164已经被证实在结肠癌、宫颈癌和成神经管细胞瘤等实体肿瘤发生和发展过程中发挥着重要作用[4-5]；最新研究结果表明CD164可作为急性成淋巴细胞性白血病中分子生物学标记[6]。目前CD164与人脑胶质瘤的相关性研究尚未见报道，为此，本研究拟探讨CD164对人脑胶质瘤细胞生长的作用，并探讨其可能作用机制。
1材料与方法
1.1组织标本
收集岳阳市第二人民医院神经外科在2012年6月～2014年6月收治的45例脑胶质瘤患者的临床标本，男22例，女23例，年龄48.9～71.2岁，平均年龄(58.6±6.4)岁，另外设立5例脑损伤患者正常脑组织标本作为对照。所有纳入本次队列的患者均经过2位经验丰富的病理科专家分别确诊为胶质瘤，且所有患者均未接受新辅助治疗。其他排除标准包括下咽困難、急慢性感染、充血性心力衰竭、COPD和肝硬化。, http://www.100md.com(李志峰 陈勇 童仲驰)