混合脱钙液与EDTA脱钙液对骨组织切片HE染色影响的分析(2)
随着医学研究的发展对组织学制作提出更高的要求，混合脱钙液越来越不适应发展的要求。而EDTA脱钙液能与钙形成一种可溶性非离子化的复合物，pH接近中性时可发生螯合作用。EDTA的优越性在于骨组织不会被气泡破坏，而且脱钙后染色酶不会被破坏，分化好，因此可用作骨组织相关酶类组织化学的研究。另外，EDTA是一种作用缓慢的脱钙剂，需要作用时间较长，故适用非速检标本。它的脱钙作用很强，除钙质外，组织中的其它金属如铁、镁、铝等亦能被除去[6-8]。
本实验中由于胫骨组织具有皮质骨硬，骨小梁易断的特点，如果脱钙不彻底可导致切片破碎、裂断。实验中用EDTA脱钙液，脱钙均匀，切片完整，染色鲜艳，着色效果好，保持良好细胞细微结构，尤其是对免疫组化染色，能保存细胞的抗原性和部分酶类的活性。
在整个制作过程中应注意以下几点：①取材时骨组织块不易过厚，一般在6 mm左右，以免脱钙时产生过长影响染色效果；②脱钙液要充足，一般为标本体积的20倍，换脱钙液1次/2 d；③脱钙时将瓶口不要盖严，在通风处放置，这样会缩短脱钙时间；④切片时刀要锋利，最好是一次性刀片，不要有划痕；⑤染色时特点注意水洗步骤，流水冲洗时不要对着组织冲洗，以免脱片[9]。
参考文献：
[1]李喜红，杨海新，张睿.两种EDTA脱钙方法的比较[J].中国实用医药杂志，2013， 4(8)：135-136.
[2]黄蓉飞，江亮，龙小艺，等.改良混合脱钙液在骨髓活检组织中的应用[J].成都医学院学报， 2014，9(6)：719-721.
[3]杨晓峰，李春阳，李春燕.改良快速骨组织脱钙法在骨肿瘤诊断中的应用[J].中国地方病防防治杂志，2016，16(1)：113.
[4]赵雨坤，郑康，郭晴晴，等.一种基于EDTA脱钙法的改良骨组织脱钙方法[J].中国实验方剂学杂志，2016，(11)：17-19.
[5]沈溪明，何欣欣，吴东霞.不同浓度和pH值EDTA脱钙液对下頜骨免疫组化结果的影响[J]. 临床与实即使病理学杂志，2014， 30(6)：696-698.
[6]董慧婷， 路志勇， 焦章平，等.不同浓度EDTA脱钙液对骨骼DNA提取效果率的影响[J].中国法医学杂志，2015：4(30)：393-395.
[7]罗灿峤，莫木琼，聂钊铭.四种脱钙液对骨和骨髓组织及结果影响的比较[J].中国组织工程研究， 2015，19(37)：5928-5932.
[8]李灿波，李海清，叶晓，等.不同脱钙液对钙化性主动脉瓣膜脱钙效果的比较[J].上海交通大学学报.2015，35(8)：1234-1237.
[9]谢蓓蓓，陈文霞.不同脱钙液对透明牙制作的影响[J].临床口腔学杂志2015，10(8)：125-127.
编辑/李樺, http://www.100md.com(吴拮 孙立国 赵成相)
本实验中由于胫骨组织具有皮质骨硬，骨小梁易断的特点，如果脱钙不彻底可导致切片破碎、裂断。实验中用EDTA脱钙液，脱钙均匀，切片完整，染色鲜艳，着色效果好，保持良好细胞细微结构，尤其是对免疫组化染色，能保存细胞的抗原性和部分酶类的活性。
在整个制作过程中应注意以下几点：①取材时骨组织块不易过厚，一般在6 mm左右，以免脱钙时产生过长影响染色效果；②脱钙液要充足，一般为标本体积的20倍，换脱钙液1次/2 d；③脱钙时将瓶口不要盖严，在通风处放置，这样会缩短脱钙时间；④切片时刀要锋利，最好是一次性刀片，不要有划痕；⑤染色时特点注意水洗步骤，流水冲洗时不要对着组织冲洗，以免脱片[9]。
参考文献：
[1]李喜红，杨海新，张睿.两种EDTA脱钙方法的比较[J].中国实用医药杂志，2013， 4(8)：135-136.
[2]黄蓉飞，江亮，龙小艺，等.改良混合脱钙液在骨髓活检组织中的应用[J].成都医学院学报， 2014，9(6)：719-721.
[3]杨晓峰，李春阳，李春燕.改良快速骨组织脱钙法在骨肿瘤诊断中的应用[J].中国地方病防防治杂志，2016，16(1)：113.
[4]赵雨坤，郑康，郭晴晴，等.一种基于EDTA脱钙法的改良骨组织脱钙方法[J].中国实验方剂学杂志，2016，(11)：17-19.
[5]沈溪明，何欣欣，吴东霞.不同浓度和pH值EDTA脱钙液对下頜骨免疫组化结果的影响[J]. 临床与实即使病理学杂志，2014， 30(6)：696-698.
[6]董慧婷， 路志勇， 焦章平，等.不同浓度EDTA脱钙液对骨骼DNA提取效果率的影响[J].中国法医学杂志，2015：4(30)：393-395.
[7]罗灿峤，莫木琼，聂钊铭.四种脱钙液对骨和骨髓组织及结果影响的比较[J].中国组织工程研究， 2015，19(37)：5928-5932.
[8]李灿波，李海清，叶晓，等.不同脱钙液对钙化性主动脉瓣膜脱钙效果的比较[J].上海交通大学学报.2015，35(8)：1234-1237.
[9]谢蓓蓓，陈文霞.不同脱钙液对透明牙制作的影响[J].临床口腔学杂志2015，10(8)：125-127.
编辑/李樺, http://www.100md.com(吴拮 孙立国 赵成相)