多发性骨髓瘤患者淋巴细胞亚群变化对免疫功能的影响研究(1)
摘 要：目的 分析多发性骨髓瘤(MM)患者外周血T淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤(NK)细胞的变化。方法 收集69例MM患者及52例健康体检人员的抗凝血，用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞总数(Lym)、CD3+ T淋巴细胞、CD19+ B淋巴细胞及CD16+56+ NK细胞数量。结果 与对照组比较，MM组Lym、CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD19+等6个项目差异均有统计学意义(P<0.05)，CD16+56+差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MM患者在疾病进程中与T淋巴细胞亚群及B淋巴细胞、Lym密切相关，对评价MM患者的免疫状况、疾病进展和疗效等方面具有重要作用。
关键词：多发性骨髓瘤；淋巴细胞亚群；流式细胞术
中图分类号：R733.3 文献标识码：A DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.01.057
文章编号：1006-1959(2018)01-0147-02
, 百拇医药
The Effect of Lymphocyte Subgroup Changes on Immune Function in Patients with Multiple Myeloma
JIA Hai-ying1，HUANG Rui1，WANG Ling-ling1，HUANG Guo-hong1，YANG Li-wei1，YU Liang2，WANG Chang-min1
(Clinical Laboratory 1， Pediatrics 2， People's Hospital of Xinjiang Uygur Autonomous Region，Urumqi830001，Xinjiang，China)
Abstract：Objective To analyze the multiple myeloma(MM)in peripheral blood of patients with T lymphocytes，B lymphocytes and natural killer (NK) cell changes.Methods Anticoagulated blood were collected from 69 MM patients and 52 cases of healthy people，with the total number of flow cytometry in peripheral blood lymphocytes(Lym)，CD3+T lymphocytes，CD19+B lymphocytes and CD16+56+NK cells.Results Compared with the control group，MM group，Lym，CD3+，CD4+，CD8+，CD4+/CD8+，CD19+and other 6 projects，the differences were statistically significant(P<0.05)，there was no significant difference between CD16+56+(P>0.05).Conclusion The MM patients in disease progression and T lymphocyte subsets and B lymphocytes， closely related to Lym to evaluate the immune status of patients with MM，and has an important role in disease progression and therapeutic effect.
, 百拇医药
Key words：Multiple myeloma；Lymphocyte subgroup；Flow cytometry
多發性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)系肿瘤性浆细胞在骨髓中多灶性恶性增生所致的一种血液系统疾病，其特点主要为血清或尿中出现单克隆免疫球蛋白或其成分(M蛋白)、可累及全身的溶骨性损害、骨痛、贫血、高钙血症等，发病率位居血液系统恶性肿瘤的第二位[1]。目前MM发病原因及机制尚不清楚，有研究表明MM患者存在细胞免疫功能紊乱[2]。本文用流式细胞术检测新疆地区69例MM患者及52例健康体检人员的淋巴细胞总数(Lym)、T淋巴细胞(CD3+)、B淋巴细胞(CD19+)和NK细胞(CD16+56+)指标，探讨其变化对MM患者机体免疫功能的影响，为进一步深入研究MM发病机制、判断预后及评价疗效提供有价值的参考指标。
1资料与方法
1.1一般资料 选取2016年1月～2017年7月在本院就诊的MM患者69例，其中男39例，女30例，年龄44～85岁，平均年龄(61.75±9.60)岁。所有程序经医院伦理委员会批准。健康对照组为在本院体检中心进行健康体检人员52例，其中男20例，女32例，年龄17～83岁，平均年龄(44.81±15.70)岁。MM诊断符合张之南主编的第3版《血液病诊断及疗效标准》[3]，排除其他急慢性感染、肿瘤及自身免疫性疾病。
, 百拇医药
1.2主要仪器和试剂 BriCyte E6流式细胞仪(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司生产)及配套荧光标记单克隆抗体试剂CD3-FITC/CD8-PE/CD45-PerCP/CD4-APC、CD3-FITC/CD16+56-PE/CD45-PerCP/CD19-APC、流式细胞仪用溶血剂，质控微球为美国Spherotech公司生产的Sphero Supra Rainbow Fluorescent Particles。
1.3方法
1.3.1标本处理 抽取空腹外周静脉血 2 ml，用 EDTA 抗凝。具体步骤：取试管2支，编号，加入全血 50 μl(反向加样)，分别加入不同的四标单克隆抗体 20 μl，充分混匀，室温下避光孵育15 min；然后加入 1×免洗溶血素 450 μl，充分混匀，室温下避光孵育15 min，待上机检测。, http://www.100md.com(贾海英 黄睿 王玲玲 黄国虹 杨丽玮 余亮 王昌敏)
关键词：多发性骨髓瘤；淋巴细胞亚群；流式细胞术
中图分类号：R733.3 文献标识码：A DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.01.057
文章编号：1006-1959(2018)01-0147-02
, 百拇医药
The Effect of Lymphocyte Subgroup Changes on Immune Function in Patients with Multiple Myeloma
JIA Hai-ying1，HUANG Rui1，WANG Ling-ling1，HUANG Guo-hong1，YANG Li-wei1，YU Liang2，WANG Chang-min1
(Clinical Laboratory 1， Pediatrics 2， People's Hospital of Xinjiang Uygur Autonomous Region，Urumqi830001，Xinjiang，China)
Abstract：Objective To analyze the multiple myeloma(MM)in peripheral blood of patients with T lymphocytes，B lymphocytes and natural killer (NK) cell changes.Methods Anticoagulated blood were collected from 69 MM patients and 52 cases of healthy people，with the total number of flow cytometry in peripheral blood lymphocytes(Lym)，CD3+T lymphocytes，CD19+B lymphocytes and CD16+56+NK cells.Results Compared with the control group，MM group，Lym，CD3+，CD4+，CD8+，CD4+/CD8+，CD19+and other 6 projects，the differences were statistically significant(P<0.05)，there was no significant difference between CD16+56+(P>0.05).Conclusion The MM patients in disease progression and T lymphocyte subsets and B lymphocytes， closely related to Lym to evaluate the immune status of patients with MM，and has an important role in disease progression and therapeutic effect.
, 百拇医药
Key words：Multiple myeloma；Lymphocyte subgroup；Flow cytometry
多發性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)系肿瘤性浆细胞在骨髓中多灶性恶性增生所致的一种血液系统疾病，其特点主要为血清或尿中出现单克隆免疫球蛋白或其成分(M蛋白)、可累及全身的溶骨性损害、骨痛、贫血、高钙血症等，发病率位居血液系统恶性肿瘤的第二位[1]。目前MM发病原因及机制尚不清楚，有研究表明MM患者存在细胞免疫功能紊乱[2]。本文用流式细胞术检测新疆地区69例MM患者及52例健康体检人员的淋巴细胞总数(Lym)、T淋巴细胞(CD3+)、B淋巴细胞(CD19+)和NK细胞(CD16+56+)指标，探讨其变化对MM患者机体免疫功能的影响，为进一步深入研究MM发病机制、判断预后及评价疗效提供有价值的参考指标。
1资料与方法
1.1一般资料 选取2016年1月～2017年7月在本院就诊的MM患者69例，其中男39例，女30例，年龄44～85岁，平均年龄(61.75±9.60)岁。所有程序经医院伦理委员会批准。健康对照组为在本院体检中心进行健康体检人员52例，其中男20例，女32例，年龄17～83岁，平均年龄(44.81±15.70)岁。MM诊断符合张之南主编的第3版《血液病诊断及疗效标准》[3]，排除其他急慢性感染、肿瘤及自身免疫性疾病。
, 百拇医药
1.2主要仪器和试剂 BriCyte E6流式细胞仪(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司生产)及配套荧光标记单克隆抗体试剂CD3-FITC/CD8-PE/CD45-PerCP/CD4-APC、CD3-FITC/CD16+56-PE/CD45-PerCP/CD19-APC、流式细胞仪用溶血剂，质控微球为美国Spherotech公司生产的Sphero Supra Rainbow Fluorescent Particles。
1.3方法
1.3.1标本处理 抽取空腹外周静脉血 2 ml，用 EDTA 抗凝。具体步骤：取试管2支，编号，加入全血 50 μl(反向加样)，分别加入不同的四标单克隆抗体 20 μl，充分混匀，室温下避光孵育15 min；然后加入 1×免洗溶血素 450 μl，充分混匀，室温下避光孵育15 min，待上机检测。, http://www.100md.com(贾海英 黄睿 王玲玲 黄国虹 杨丽玮 余亮 王昌敏)