手足口病患儿体内免疫球蛋白、补体、C反应蛋白及刺激分析CD80、CD86水平的临床意义及其与丙种球蛋白治疗疗效的关系(2)
Key words：Hand-foot-mouth disease；Immunoglobulin；Complement；C-reactive protein；CD80/CD86；Gamma globulin
手足口病(hand-foot-mouth disease，HFMD)是由柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)和肠道病毒71型(EV71)等肠道病毒引起的急性传染病，好发于学龄前儿童。多数患儿症状较轻，主要临床症状包括口腔腭咽等粘膜组织出现疼痛性水泡，四肢及臀部的皮疹、疱疹，同时伴有发热、纳差、咳嗽等消化呼吸系统症状，少数患儿合并心肌炎、病毒性脑膜炎、肺水肿等严重并发症，可致患儿死亡。对于重症手足口病，早期诊断并尽早对症治疗是临床工作的关键，有许多研究显示机体免疫状况与该疾病病情进展密切相关[1-2]。本研究拟通过观察120例患儿及30例正常儿童的血清免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)、补体、C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)及刺激分子CD80、CD86水平，探究相关指标与病情严重程度之间的关系，同时探究重症患者联合使用丙种球蛋白对相关指标的影响，现报道如下。
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1资料与方法
1.1一般资料 观察对象为我院儿科2015年7月～11月收治的60例重症HFMD患儿及60例非重症HFMD患儿，同时收集30例正常儿童血清样本作为对照组。重症HFMD患儿60例，男性34例，女性26例，年龄6个月～4岁，平均年龄(2.2±0.6)岁；其中A组患儿30例，男性17例，女性13例，年龄6个月～4岁，平均年龄(2.1±0.7)岁；B组患儿30例，男性17例，女性13例，年龄8个月～4岁，平均年龄(2.4±0.9)岁。非重症HFMD患儿60例，男性37例，女性23例，年龄7个月～5岁，平均年龄(3.2±1.2)岁。正常儿童30例，男性15例，女性15例，年龄10个月～7岁，平均年龄(3.2±1.4)岁。各组患儿男女比例、年龄之间差异均无统计学意义(P>0.05)。
1.2纳入标准 ①符合《手足口病诊疗指南》(2013年版)诊断标准；②患儿年龄为6个月～9岁；③所有患儿家属均知情此次研究并自愿参与，同时取得家属同意并在知情同意书上签字。排除标准为：①排除合并过敏、麻疹、水痘、风疹、带状疱疹、等出疹性疾病；②排除合并其他心肝肾造血系统疾病；③排除免疫缺陷疾病。
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1.3对象分组 ①普通组患儿仅口腔腭咽等粘膜组织出现疼痛性水泡，手足及臀部的皮疹、疱疹，可伴发热、纳差、咳嗽等症狀；②重症组患儿在上述症状出现的同时，出现体温持续增高、精神萎靡、嗜睡、头痛头晕、恶心呕吐；肌张力增高；脑膜刺激征；心悸、心绞痛；呼吸困难等；③对照组为常规体检未出现异常的儿童。
1.4观察指标 患儿入院后2 h内检查项目包括血清免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)、C反应蛋白(C-reactive protein ，CRP)、补体C3、C4、刺激分子CD80、CD86，出院时或1周后复查各项指标。
1.5方法
1.5.1检测方法 取患者入院后2 h内4 ml静脉血，置于干燥离心管中进行离心，转速3000 r/min，时长10 min，分离上层血清。免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)采用免疫散射比浊法检测，所用仪器为贝克曼Immage 800型特种蛋白仪，检测试剂为英国The Binding Site公司生产。CRP采用胶乳免疫比浊法，检测试剂为elabscience公司生产补体C3、C4采用散射比浊法，检测试剂为四川迈克公司生产，均严格按照操作规程进行。对患儿清晨空腹采集2 ml静脉血，进行外周血CD80、CD86细胞检测，EDTA-K2抗凝。24 h内采用细胞流式仪CytoFLEX检测CD80、CD86细胞的阳性率，通过(%)表示，通过BD DIVA软件进行分析。
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1.5.2治疗方法 普通组及重症组患者均对症营养支持治疗，A组病毒唑静滴，剂量10～15 mg/(kg·d)，同时增加5%葡萄糖、小儿氨基酸、小儿电解质、甲基强的松龙1～2 mg/(kg·d)，甘露醇等对症治疗；B组在A组的治疗基础上联用丙种球蛋白。
1.6统计学方法 数据采用SPSS19.0统计软件分析，计量资料采用(x±s)表示，并使用方差分析比较各组检查结果差异是否有统计学意义(α=0.05)，SNK法进行组间比较。
2结果
2.1治疗前患儿血清免疫球蛋白水平差异 比较三组患儿入院时血清免疫球蛋白水平差异，方差分析比较各组之间差异。治疗前重症组患儿血清IgA、IgG、IgM水平低于普通组及对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，普通组血清IgA、IgG、IgM水平低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。
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2.2治疗前后患儿血清补体C3、C4水平差异 比较三组患儿入院时补体C3、C4水平差异，方差分析比较各组之间差异。治疗前重症组患儿血清补体C3、C4水平显著低于普通组及对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，普通组血清补体C3水平显著低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。普通组补体C4与对照组差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。
2.3治疗前后患儿CRP水平差异 比较三组患儿入院时CRP水平差异，方差分析比较各组之间差异是否有统计学意义。治疗前重症组患儿血清CRP水平明显高于普通组及对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，普通组CRP水平显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。
2.4治疗前后患儿刺激分子CD80、CD86水平差异显著 比较三组患儿入院时刺激分子CD80、CD86水平差异，方差分析比较各组之间差异。重症组患儿外周血CD80、CD86显著高于普通组及对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，普通组CD80、CD86显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表4。, http://www.100md.com(覃艺 邓燕艺 赖昌生)
手足口病(hand-foot-mouth disease，HFMD)是由柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)和肠道病毒71型(EV71)等肠道病毒引起的急性传染病，好发于学龄前儿童。多数患儿症状较轻，主要临床症状包括口腔腭咽等粘膜组织出现疼痛性水泡，四肢及臀部的皮疹、疱疹，同时伴有发热、纳差、咳嗽等消化呼吸系统症状，少数患儿合并心肌炎、病毒性脑膜炎、肺水肿等严重并发症，可致患儿死亡。对于重症手足口病，早期诊断并尽早对症治疗是临床工作的关键，有许多研究显示机体免疫状况与该疾病病情进展密切相关[1-2]。本研究拟通过观察120例患儿及30例正常儿童的血清免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)、补体、C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)及刺激分子CD80、CD86水平，探究相关指标与病情严重程度之间的关系，同时探究重症患者联合使用丙种球蛋白对相关指标的影响，现报道如下。
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1资料与方法
1.1一般资料 观察对象为我院儿科2015年7月～11月收治的60例重症HFMD患儿及60例非重症HFMD患儿，同时收集30例正常儿童血清样本作为对照组。重症HFMD患儿60例，男性34例，女性26例，年龄6个月～4岁，平均年龄(2.2±0.6)岁；其中A组患儿30例，男性17例，女性13例，年龄6个月～4岁，平均年龄(2.1±0.7)岁；B组患儿30例，男性17例，女性13例，年龄8个月～4岁，平均年龄(2.4±0.9)岁。非重症HFMD患儿60例，男性37例，女性23例，年龄7个月～5岁，平均年龄(3.2±1.2)岁。正常儿童30例，男性15例，女性15例，年龄10个月～7岁，平均年龄(3.2±1.4)岁。各组患儿男女比例、年龄之间差异均无统计学意义(P>0.05)。
1.2纳入标准 ①符合《手足口病诊疗指南》(2013年版)诊断标准；②患儿年龄为6个月～9岁；③所有患儿家属均知情此次研究并自愿参与，同时取得家属同意并在知情同意书上签字。排除标准为：①排除合并过敏、麻疹、水痘、风疹、带状疱疹、等出疹性疾病；②排除合并其他心肝肾造血系统疾病；③排除免疫缺陷疾病。
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1.3对象分组 ①普通组患儿仅口腔腭咽等粘膜组织出现疼痛性水泡，手足及臀部的皮疹、疱疹，可伴发热、纳差、咳嗽等症狀；②重症组患儿在上述症状出现的同时，出现体温持续增高、精神萎靡、嗜睡、头痛头晕、恶心呕吐；肌张力增高；脑膜刺激征；心悸、心绞痛；呼吸困难等；③对照组为常规体检未出现异常的儿童。
1.4观察指标 患儿入院后2 h内检查项目包括血清免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)、C反应蛋白(C-reactive protein ，CRP)、补体C3、C4、刺激分子CD80、CD86，出院时或1周后复查各项指标。
1.5方法
1.5.1检测方法 取患者入院后2 h内4 ml静脉血，置于干燥离心管中进行离心，转速3000 r/min，时长10 min，分离上层血清。免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)采用免疫散射比浊法检测，所用仪器为贝克曼Immage 800型特种蛋白仪，检测试剂为英国The Binding Site公司生产。CRP采用胶乳免疫比浊法，检测试剂为elabscience公司生产补体C3、C4采用散射比浊法，检测试剂为四川迈克公司生产，均严格按照操作规程进行。对患儿清晨空腹采集2 ml静脉血，进行外周血CD80、CD86细胞检测，EDTA-K2抗凝。24 h内采用细胞流式仪CytoFLEX检测CD80、CD86细胞的阳性率，通过(%)表示，通过BD DIVA软件进行分析。
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1.5.2治疗方法 普通组及重症组患者均对症营养支持治疗，A组病毒唑静滴，剂量10～15 mg/(kg·d)，同时增加5%葡萄糖、小儿氨基酸、小儿电解质、甲基强的松龙1～2 mg/(kg·d)，甘露醇等对症治疗；B组在A组的治疗基础上联用丙种球蛋白。
1.6统计学方法 数据采用SPSS19.0统计软件分析，计量资料采用(x±s)表示，并使用方差分析比较各组检查结果差异是否有统计学意义(α=0.05)，SNK法进行组间比较。
2结果
2.1治疗前患儿血清免疫球蛋白水平差异 比较三组患儿入院时血清免疫球蛋白水平差异，方差分析比较各组之间差异。治疗前重症组患儿血清IgA、IgG、IgM水平低于普通组及对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，普通组血清IgA、IgG、IgM水平低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。
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2.2治疗前后患儿血清补体C3、C4水平差异 比较三组患儿入院时补体C3、C4水平差异，方差分析比较各组之间差异。治疗前重症组患儿血清补体C3、C4水平显著低于普通组及对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，普通组血清补体C3水平显著低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。普通组补体C4与对照组差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。
2.3治疗前后患儿CRP水平差异 比较三组患儿入院时CRP水平差异，方差分析比较各组之间差异是否有统计学意义。治疗前重症组患儿血清CRP水平明显高于普通组及对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，普通组CRP水平显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。
2.4治疗前后患儿刺激分子CD80、CD86水平差异显著 比较三组患儿入院时刺激分子CD80、CD86水平差异，方差分析比较各组之间差异。重症组患儿外周血CD80、CD86显著高于普通组及对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，普通组CD80、CD86显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表4。, http://www.100md.com(覃艺 邓燕艺 赖昌生)