以大黄素为声敏剂介导声动力疗法对小鼠动脉粥样硬化治疗作用的研究(2)
1 材料与方法1.1动物与试剂 健康雌性ApoE-/-小鼠,50只,鼠龄 7周龄,体重18~22 g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司。大黄素购自陕西西安森弗生物技术有限公司。油红O,购自Sigma公司。反转录试剂盒及SYBR荧光定量PCR试剂盒均购自北京天根生化科技有限公司。引物为自行设计,由上海生工生物工程有限公司合成。高脂饲料(21.32%脂肪,0.15%胆固醇)购自北京科澳协力饲料有限公司。
1.2方法
1.2.1动物分组及处理 所有ApoE-/-小鼠适应性喂养1周后,随机将小鼠分为不做任何处理的模型对照组、以5-氨基酮戊酸介导的阳性对照组、大黄素高、中、低剂量介导SDT组,每组 10只。模型組只进行高脂饮食12 周。从高脂第4周起,阳性对照组每隔1 d静脉注射60 mg/kg 5-氨基酮戊酸2 h后,进行声动力治疗[2]。大黄素高、中、低剂量介导SDT组静脉分别注射大黄素30、60和90 mg/kg 2 h后,进行声动力治疗。声动力治疗每次声强为1.5 W/cm2,持续时间15 min,持续8周。
1.2.2心脏冷冻切片 用PBS进行心脏灌注,待肝脏颜色变白后,取小鼠的心脏,用OCT包埋后,用冷冻切片机进行冷冻切片,厚度为5 μm。留取主动脉根部大约30~40张切片用于后续实验 ......
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