当前位置: 首页 > 期刊 > 《医学信息》 > 2018年第7期
编号:13240505
LMP1经Wnt1/β—catenin途径促进鼻咽癌干细胞SP18增殖(2)
http://www.100md.com 2018年2月19日 《医学信息》 2018年第7期
     1.4软琼脂集落实验 用琼脂糖制备0.6%底层琼脂,冷却后用琼脂糖及细胞制备0.3%顶层琼脂(每孔含2×103个细胞)。实验设SP18-LMP1和SP18-LMP1TRADD细胞组,每组3个平行孔,然后将24孔板置于37℃ 5% CO2温箱内培养2周后。观察集落形成情况并计数,其中细胞数大于50个细胞为1个集落,每孔重复计数3次,取3孔均值为每组集落数。计算细胞集落形成率为集落数比接种细胞数即为集落形成率。

    1.5 Western-blot检测蛋白表达 收集细胞,提取细胞总蛋白,以30 μg总蛋白/泳道,进行10% SDS不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,转膜、封闭,一抗(1∶1000)室温孵育滤膜1 h,洗膜,HRP标记二抗(1∶1000)室温孵育滤膜1 h,洗膜后曝光、显影、定影,分析结果。

    1.6统计学处理 采用SPSS22.0统计分析软件进行分析,计量资料数据用(x±s)表示 ......
上一页1 2 3下一页

您现在查看是摘要页,全文长 3662 字符