甘露糖结合凝集素基因多态性与结核病易感性关系的研究(2)
1.2方法1.2.1采用血液样本 EDTA抗凝管采集研究对象晨起空腹静脉血3 ml,摇晃后置于冰箱冷藏备用。
1.2.2提取血液DNA 使用天根生化科技有限公司生产的基因组DNA提取试剂盒(血液/细胞/组织)提取全血基因组DNA,按照试剂盒说明书的实验步骤进行操作:取一支EP管,管中加入300 μl抗凝血,再加入900 μl细胞裂解液A,温和混勾,12000 rpm离心1 min,小心弃去上清,留下细胞核沉淀;向沉淀中加入600 μl缓冲液B,温和震蕩混勾,加入10 μl蛋白酶K,颠倒10次混匀(约15 s),65 ℃水浴15~30 min至沉淀完全裂解;将混匀的液体转入离心柱中,静置2 min,12000 rpm,离心1 min,弃废液;再次12000 rpm离心2 min,将离心柱置于新离心管中,并打开离心柱盖,于室温放置5~10 min至无明显乙醇味;在硅质膜中央加入100 μl Solution E,置于室温5 min后,12000 rpm离心2 min;离心得到的溶液再次加入离心柱中 ......
您现在查看是摘要页,全文长 4092 字符。