1材料与方法

    1.1 Hep2细胞 人喉癌Hep2细胞系来自美国国家癌症研究所病理实验室，由白求恩国际和平医院耳鼻咽喉科实验室传代培养。冻存Hep2细胞于37 ℃快速解冻，1000 rpm离心 5 min，用RPMI 1640培养基清洗1次，重悬后再离心，使用全培养基，设置为37 ℃培养于5%CO2的湿度培养箱中。

    1.2主要抗体及试剂盒 免疫细胞化学试剂盒(SP-9002)系北京中杉金桥生物技术公司产品；磁珠分选试剂盒购自德国美天旎公司，p75NTR兔抗人单克隆抗体(ab52987)购自Abcam公司；CD133(18470-1-AP，proteintech)；HRP-山羊抗兔IgG(北京中杉金桥生物技术公司)；CY3标记兔二抗(protech)；Hoechst(碧云天)。

    1.3仪器设备 荧光显微镜(DMIRB，德国Leica)；TGL-16G高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)；流式细胞仪(美国Becton Dickinson FAC公司)；Hera CO2培养箱(德国GMBH公司)。

    1.4免疫细胞化学及免疫荧光染色 将清洁消毒的20 mm盖玻片置于六孔板培养皿中 ......