1.2定量聚合酶链反应 实时聚合酶链反应(PCR)技术是检测ctDNA常见方式。在此基础上加以改进，可提高ctDNA检测的敏感性和特异性[19]。

    改良PCR技术的扩增阻碍突变系统(ARMS)。ARMS核心在于突变特异性探针，该探针由连接到3'和5'末端的荧光团和猝灭剂组合而成。存在突变的时，探针与靶位点结合发生聚合酶反应，促使荧光团和猝灭剂分离，荧光含量增加后对其检测和测量;反之，荧光标记物难以测出[20]。在此基础上可通过添加等位基因特异性Scorpion引物(ARMS/S)进一步改进PCR技术。这些Scorpion引物具有茎環部分，茎环上有荧光团和猝灭剂。环序列与PCR产物互补，促使茎环的解折叠，在PCR扩增的退火/延伸阶段期间产生荧光[21]。例如：肽核酸(PNA)能够选择性聚集突变PCR产物，抑制野生型等位基因的扩增[22]。

    ARMS/S技术用于ctDNA中EGFR突变检测的具有较高的特异性和较低的灵敏性。Kimura H等[23]将此项技术应用于42例NSCLC患者的配对的肿瘤血清样品中，仅发现3例不一致病例，证实ARMS/S技术的具有高度特异性;IPASS研究表明ARMS/S具有高特异性(100% ......