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编号:13422894
DLPME-HPLC法同时测定人血清中维生素A和维生素E含量(2)
http://www.100md.com 2019年5月21日 《医学信息》 2019年第20期
     1材料与方法

    1.1材料 2018年5月于宁夏医科大学附属医院随机抽取正常学生体检血液样本50例,其中男25例,女25例,年龄22~27岁,平均年龄(23.60±1.40)岁。

    1.2仪器与试剂 高效液相色谱仪(D2000,日立),C18反相色谱柱(依利特C18 ODS柱,4.6 mm×25 cm,5.0 μm),同类型保护柱;WH-0微型漩涡混合仪;台式高速离心机(日立)。维生素A(视黄醇)标准品(Sigma,>99%),维生素E标准品(Sigma,>95%);二氯甲烷(色谱纯)、三氯甲烷(色谱纯);甲醇(色谱纯),实验用水为优普超纯水(18.25 MΩ·cm)。

    1.3实验方法

    1.3.1色谱条件 色谱柱为依力特C18反相色谱柱;流动相为甲醇∶水=98∶2;流速为0.8 ml/min,柱温为50℃;紫外检测波长:维生素A最佳吸收波长为325 nm,维生素E最佳吸收波长为290 nm。采用日立D-2000液相色谱仪完成,应用切换波长程序,实现维生素A、维生素E的同时测定。

    1.3.2标准样品制备及标准曲线的绘制 ①标准样品制备:分别用甲醇配置维生素A标准储备液(1 mg/ml),维生素E标准储备液(2 mg/ml)于-20℃冰箱冷藏保存;维生素A和维生素E混合标准应用液(维生素A:1 μg/ml ......
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