四种特殊染色在泪道放线菌感染诊断中的应用(2)
1资料与方法1.1一般资料 收集2010年12月~2019年6月复旦大学附属眼耳鼻喉科医院30例眼科收治的诊断结果为泪道放线菌感染病例。其中女24例,男6例;年龄39~85岁,平均年龄64.6岁;左眼9例,右眼13例,双眼1例,左右眼情况不详7例。最常见入院症状为流泪,溢泪增多,其次为粘液样分泌物伴黄白色分泌物和流脓,部分伴有眼红眼痛和异物感。患者行泪道切开术后见放线菌颗粒,亦称硫磺颗粒,常规病理送检,并进行HE染色和六胺银、PAS、革兰染色、抗酸染色四种特殊染色。
1.2方法 患者行泪道切开术取出放线菌形成的小菌落样结构即硫磺颗粒,并送检,标本经10%福尔马林固定,经梯度脱水和梯度透明后浸蜡包埋,并制成厚度为4 μm的白片各5张。并分别进行常规HE染色和六胺银、PAS、革兰染色、抗酸染色四种特殊染色(所有试剂盒均来源于珠海贝索公司)。
1.2.1 HE染色 操作方法:①切片常规脱蜡至水;②58 ℃热苏木素染色2~3 min后流水冲洗。③盐酸酒精分化2~3 s,流水冲洗;④温水10 s返蓝;⑤95%酒精浸泡2 min;⑥直接入醇溶性伊红染液15~30 s;⑦梯度脱水透明 ......
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