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编号:13846956
抗核抗体对人绒毛膜滋养层细胞系HTR8增殖及凋亡的影响(2)
http://www.100md.com 2020年3月26日 《医学信息》 202012
     1材料与方法

    1.1细胞及试剂 人HTR8细胞购于上海富衡生物科技有限公司,胎牛血清购自Excell bio;DMEM/F12培养基购自Transgen Biotech公司;胰蛋白酶购自HyClone公司;凋亡试剂盒购自Biolegend;CCK-8购自Solarbio试剂有限公司;Anti-Bcl-2,Anti-Bax购自Bioss。将人HTR8细胞置于37℃5%的CO2培养箱中,10%胎牛血清、1%青霉素链霉素双抗DMEM/F12培养基培养,每天换液,隔日传代,取对数生长期细胞进行实验。

    1.2 CCK8检测抗核抗体对HTR8细胞的增殖作用 将HTR8细胞加入96孔培养板,每孔100 μl(5×103/孔),分组如下:①Control组;②抗核抗体低浓度组(滴度1∶100);③抗核抗体高浓度组(滴度≥1∶320)。培养24 h后,每孔加入10 μl CCK-8,37℃ 5%CO2培养箱中孵育4 h,酶标仪(上海三科仪器有限公司318C)测定450 nm处的吸光度。

    1.3流式细胞术检测抗核抗体对HTR8细胞的凋亡作用 将浓度1×105/ml细胞接种于6孔培养板 ......
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