收养需要中二联体亲子鉴定4个STR基因座突变1例
关键词：二联体亲子鉴定;常染色体;遗传标记;突变
中图分类号：Q987 文献标识码：B DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.15.062
文章编号：1006-1959(2020)15-0189-02
1简要案情
刘某(女)因收养刘小某(女)需要，委托广东华天法医物证司法鉴定所证明二人为非母女亲子关系。受理委托后，分别采集刘某与刘小某指尖血于FTA采血卡上备检。依据《法庭科学DNA实验室检验规范》(GA/T383-2014)、《亲权鉴定技术规范》(GB/T 37223-2018)，采用Chelex-100[1]法提取DNA，采用ABI公司Huaxia Platinum试剂盒对23个常染色体进行复合PCR扩增，结果显示刘某与刘小某仅在基因座D8S1179上不符合孟德尔遗传规律，累积亲权指数(CPI)为189.94(>0.0001)，依据《亲权鉴定技术规范》(GB/T 37223-2018)无法排除劉某与刘小某的母女亲子关系;随后采用苏州阅微公司Microreader 23sp ID System试剂盒对18个常染色体进行复合PCR扩增，结果显示刘某与刘小某在基因座D8S1132、D9S925和D5S2500上不符合孟德尔遗传规律，见表1。两个试剂盒共41个常染色体基因座在4个基因座上不符合孟德尔遗传规律，其中基因座D8S1132和D9S925相差1个重复单位，基因座D5S2500相差3个重复单位，基因座D8S1179相差5个重复单位，但41个基因座的CPI为0.0006(>0.0001)。若考虑亲子鉴定使用的STR遗传标记的总突变率约2‰[2]，依据亲权鉴定规范仍不能排除刘某与刘小某之间的母女亲子关系。据委托方刘某描述，刘某与刘小某之间不属于近亲关系，于是补采刘小某生父马某血样，提取DNA，采用Huaxia Platinum试剂盒对马某基因组DNA进行分型，分析马某、刘小某与刘某三联体基因型，见表2，刘小某与刘某在D8S1179、D22S1045、D5S818、PentaD共4个基因座上不符合孟德尔遗传规律，Huaxia Platinum试剂盒23个基因座CPI为4.8857×10-12(<0.0001)，排除刘某为刘小某的生物学母亲。以上实验均设置阴性对照样本和阳性对照样本，用ABI-3130XL遗传分析仪进行毛细管电泳，用GeneMapper ID-X软件进行基因分型分析，实验过程按照本实验室作业指导书进行。
2讨论
依据《亲权鉴定技术规范》(GB/T37223-2018)，累积亲权指数<0.0001时，支持被检测男子(或被检测女子)不是孩子生物学父亲(或母亲)的假设;累积亲权指数>10000时，支持被检测男子(或被检测女子)是孩子生物学父亲(或母亲)的假设。累积亲权指数>0.0001而<10000时，应当通过增加检测的遗传标记来达到要求。与三联体亲子鉴定相比，二联体亲子鉴定各遗传标记系统的非父排除率较低，随着检测的遗传标记数目增多，累积非父排除概率增大，鉴定能力增强。但是随着检测的遗传标记增多，遇到遗传变异的可能性也增加。已有很多文献报道STR基因座等位基因发生突变的现象，在本所日常亲子鉴定案件中也常有发生，但多为1～2个基因座发生突变，3个STR基因座同时发生突变已属于罕见[3，4]。在二联体亲子鉴定中，通过检测遗传标记的方法，至少应根据3个以上的遗传标记来否定父权。在检见4个不符合孟德尔遗传规律基因座的案件中已基本可以否定父权，但本案例中检见极罕见的4个STR基因座同时不符合遗传规律，仍然不能否定父权。
本案例在第1次检测的23个基因座中，刘某与刘小某仅在一个基因座上不符合孟德尔遗传规律，增加检测的遗传标记至41个时，不符合遗传规律的基因座也增加至4个，但CPI为0.0006(>0.0001)，仍不能排除刘某与刘小某之间的母女亲子关系。在排除近亲的情况后，加入生父马某的遗传标记作为参照，刘小某与刘某在D8S1179、D22S1045、D5S818、PentaD4个基因座上不符合孟德尔遗传规律，CPI<0.0001，排除刘某为刘小某的生物学母亲。突变是导致亲代与子代的遗传标记不符合遗传规律的重要原因，可能会影响到亲子鉴定结果的正确性。在遗传标记的鉴别能力较差时，无血缘关系的男子(或女子)与孩子的遗传标记偶然也会符合遗传规律，因而不能否定他(她)与孩子有亲子关系。在二联体亲子鉴定中，增加遗传标记的检测能够增加累积非父排除概率，结合基因座突变率计算累积亲权指数，有可能会排除其亲子关系，41个STR基因座的联合应用能够有效解决二联体亲子鉴定中的大部分突变案例，但依然有错判的风险[4]。因此，建议单亲亲子鉴定在增加检测遗传标记的基础上，应当尽可能增加生父或生母样本，降低错判风险，增加鉴定能力。
参考文献：
[1]侯一平.法医物证学[M].第4版.北京：人民卫生出版社，2016：177-183.
[2]张晓妍，涂丽芳，张四平.亲子鉴定中D18S51基因座等位基因丢失分析1例[J].医学信息，2019，32(z2).
[3]李海霞，孙宏钰，张何，等.3个STR基因座同时突变的亲子鉴定案1例[J].法医学杂志，2009，25(4)：319-320.
[4]吴婕，杨金龙，熊新，等.二联体亲权鉴定风险分析[J].中国法医学杂志，2017，32(3)：269-271.
收稿日期：2020-05-29;修回日期：2020-06-08
编辑/杜帆, http://www.100md.com(乔红花 张伟)
中图分类号：Q987 文献标识码：B DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.15.062
文章编号：1006-1959(2020)15-0189-02
1简要案情
刘某(女)因收养刘小某(女)需要，委托广东华天法医物证司法鉴定所证明二人为非母女亲子关系。受理委托后，分别采集刘某与刘小某指尖血于FTA采血卡上备检。依据《法庭科学DNA实验室检验规范》(GA/T383-2014)、《亲权鉴定技术规范》(GB/T 37223-2018)，采用Chelex-100[1]法提取DNA，采用ABI公司Huaxia Platinum试剂盒对23个常染色体进行复合PCR扩增，结果显示刘某与刘小某仅在基因座D8S1179上不符合孟德尔遗传规律，累积亲权指数(CPI)为189.94(>0.0001)，依据《亲权鉴定技术规范》(GB/T 37223-2018)无法排除劉某与刘小某的母女亲子关系;随后采用苏州阅微公司Microreader 23sp ID System试剂盒对18个常染色体进行复合PCR扩增，结果显示刘某与刘小某在基因座D8S1132、D9S925和D5S2500上不符合孟德尔遗传规律，见表1。两个试剂盒共41个常染色体基因座在4个基因座上不符合孟德尔遗传规律，其中基因座D8S1132和D9S925相差1个重复单位，基因座D5S2500相差3个重复单位，基因座D8S1179相差5个重复单位，但41个基因座的CPI为0.0006(>0.0001)。若考虑亲子鉴定使用的STR遗传标记的总突变率约2‰[2]，依据亲权鉴定规范仍不能排除刘某与刘小某之间的母女亲子关系。据委托方刘某描述，刘某与刘小某之间不属于近亲关系，于是补采刘小某生父马某血样，提取DNA，采用Huaxia Platinum试剂盒对马某基因组DNA进行分型，分析马某、刘小某与刘某三联体基因型，见表2，刘小某与刘某在D8S1179、D22S1045、D5S818、PentaD共4个基因座上不符合孟德尔遗传规律，Huaxia Platinum试剂盒23个基因座CPI为4.8857×10-12(<0.0001)，排除刘某为刘小某的生物学母亲。以上实验均设置阴性对照样本和阳性对照样本，用ABI-3130XL遗传分析仪进行毛细管电泳，用GeneMapper ID-X软件进行基因分型分析，实验过程按照本实验室作业指导书进行。
2讨论
依据《亲权鉴定技术规范》(GB/T37223-2018)，累积亲权指数<0.0001时，支持被检测男子(或被检测女子)不是孩子生物学父亲(或母亲)的假设;累积亲权指数>10000时，支持被检测男子(或被检测女子)是孩子生物学父亲(或母亲)的假设。累积亲权指数>0.0001而<10000时，应当通过增加检测的遗传标记来达到要求。与三联体亲子鉴定相比，二联体亲子鉴定各遗传标记系统的非父排除率较低，随着检测的遗传标记数目增多，累积非父排除概率增大，鉴定能力增强。但是随着检测的遗传标记增多，遇到遗传变异的可能性也增加。已有很多文献报道STR基因座等位基因发生突变的现象，在本所日常亲子鉴定案件中也常有发生，但多为1～2个基因座发生突变，3个STR基因座同时发生突变已属于罕见[3，4]。在二联体亲子鉴定中，通过检测遗传标记的方法，至少应根据3个以上的遗传标记来否定父权。在检见4个不符合孟德尔遗传规律基因座的案件中已基本可以否定父权，但本案例中检见极罕见的4个STR基因座同时不符合遗传规律，仍然不能否定父权。
本案例在第1次检测的23个基因座中，刘某与刘小某仅在一个基因座上不符合孟德尔遗传规律，增加检测的遗传标记至41个时，不符合遗传规律的基因座也增加至4个，但CPI为0.0006(>0.0001)，仍不能排除刘某与刘小某之间的母女亲子关系。在排除近亲的情况后，加入生父马某的遗传标记作为参照，刘小某与刘某在D8S1179、D22S1045、D5S818、PentaD4个基因座上不符合孟德尔遗传规律，CPI<0.0001，排除刘某为刘小某的生物学母亲。突变是导致亲代与子代的遗传标记不符合遗传规律的重要原因，可能会影响到亲子鉴定结果的正确性。在遗传标记的鉴别能力较差时，无血缘关系的男子(或女子)与孩子的遗传标记偶然也会符合遗传规律，因而不能否定他(她)与孩子有亲子关系。在二联体亲子鉴定中，增加遗传标记的检测能够增加累积非父排除概率，结合基因座突变率计算累积亲权指数，有可能会排除其亲子关系，41个STR基因座的联合应用能够有效解决二联体亲子鉴定中的大部分突变案例，但依然有错判的风险[4]。因此，建议单亲亲子鉴定在增加检测遗传标记的基础上，应当尽可能增加生父或生母样本，降低错判风险，增加鉴定能力。
参考文献：
[1]侯一平.法医物证学[M].第4版.北京：人民卫生出版社，2016：177-183.
[2]张晓妍，涂丽芳，张四平.亲子鉴定中D18S51基因座等位基因丢失分析1例[J].医学信息，2019，32(z2).
[3]李海霞，孙宏钰，张何，等.3个STR基因座同时突变的亲子鉴定案1例[J].法医学杂志，2009，25(4)：319-320.
[4]吴婕，杨金龙，熊新，等.二联体亲权鉴定风险分析[J].中国法医学杂志，2017，32(3)：269-271.
收稿日期：2020-05-29;修回日期：2020-06-08
编辑/杜帆, http://www.100md.com(乔红花 张伟)