蔡丽雯，徐晓军

    (浙江大学医学院附属儿童医院血液肿瘤科，浙江 杭州 310003)

    二代测序(next-generation sequencing，NGS)又称下一代测序，是可以并行测定大规模DNA 碱基对的技术[1]。近年来，二代测序技术以其高通量、高灵敏度、易于操作、相对定量等优点，在精准医学领域迅速发展应用。在儿童白血病领域，通过二代测序技术，越来越多的突变基因被证实在疾病起源、病情发展、预后及复发等各个方面具有重要意义。通过检测追踪相关基因，可以对白血病患者的治疗反应进行预测及分层治疗，使白血病的治疗更加精确。此外，不同时间点对白血病相关突变基因进行NGS检测也能及时发现新的突变并追踪白血病克隆演变。本文通过分析国内外相关文章，对二代测序在儿童白血病初诊、微小残留病变监测及克隆演变追踪方面的应用进行探讨。

    1 NGS 在初诊白血病的应用

    与以往传统的测序技术相比，NGS 实现了大规模并行测序，可以全面、高效率地发现更多有意义的突变基因，同时加深对已发现基因的理解。近年来，NGS 逐渐演变出针对不同目的检测的多种策略[2]，目前认为对于初诊白血病具有应用价值的主要有高深度Panel、全外显子组测序(whole exome sequencing，WES)、转录组测序(RNASeq)、全免疫组测序(immune repertoire sequencing，IRseq)和单细胞测序技术[3]。这些技术的结合可以更好地应对白血病基因的复杂性，也为揭示白血病突变基因与临床特征及预后的联系提供了更多证据。

    高深度Panel 的检测范围相对传统Panal 而言更全面，包含了血液肿瘤的常见基因，灵敏度可达到0.03%，对于白血病这类疾病而言针对性强，检出率高，并使后续多个基因的监测更为便捷[4]。由于其测定目标明确，在成本上也就相对低，更具经济适用性，对于临床诊断明确的白血病患者而言是一个较好的选择。但这种方法检测基因较固定，对于未包含在内的基因则无法检出，也不能发现新的突变基因。WES 可以测定全部外显子基因，对于体细胞与胚系的突变谱都具有检测意义，灵敏度通常在1%。由于其检测范围十分广泛，可延伸发现更多有临床意义的基因 ......