蝎形引物ＰＣＲ快速检测环境水样中沙门菌方法研究
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摘要： [目的]以蝎形引物PCR技术为基础建立一套环境水样沙门菌的快速检测方法。[方法]选择沙门菌池此基因设计出以荧光素(PAM)和淬灭物(DABCYL)双标记探针的茎环尾状结构构成蝎形引物，对8种沙门菌和8种非沙门菌经增菌、DNA提取后，以蝎形引物P(：R方法进行检测，探讨该检测方法的可行性、特异性和灵敏度，并与普通引物P(：R法检测50份环境水样进行比较。[结果]蝎形引物PCR方法检测沙门菌，细菌密度与荧光相对强度存在着量比关系，与普通引物PCR法比较，具有快速、特异、灵敏度高的特点，在50u1PCR反应体系中最低可检出2cfa沙门菌。[结论]沙门菌蝎形引物在PCR扩增中，探针可特异地与目的DNA片段杂交，使DABCYL不能有效地淬灭PAM产生的荧光，荧光可经仪器直读检出。所建立的快速检测方法可定性或定量的用于环境水样中沙门菌检测。
关键词： 蝎形引物；快速检测；沙门菌；PCR
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